论文摘要
核酶（ribozyme or RNAzyme）是一类具有催化活性的单链寡RNA 分子,它能通过碱基配对特异性地切割底物RNA 分子。脱氧核酶（Deoxyribozyme or DNAzyme or DNA enzyme）是20 世纪90 年代才被人们所发现的一类具有催化活性的DNA 分子。我们以β-内酰胺酶mRNA 为靶位点, 设计并合成了RNA-DNAzyme（Rz-Dz）基因,将其克隆到pBluescript II KS（+） phagemid 中,通过噬菌体表达系统产生含有DNAzyme 序列的单链环状DNA 分子（dRz-Dz）。体外实验表明,dRz-Dz 在某些二价金属离子辅助下具有特异性切割RNA 底物的活性。将重组质粒经体外转录后,其转录产物（rRz-Dz）含RNAzyme 序列。rRz-Dz 的体外实验表明,此核酶部分也有特异切割底物RNA的活性,且此活性在一定范围内与Mg2+的离子浓度成正比。将构建的Rz-Dz、RNAzyme（Rz）、DNAzyme（Dz） 重组子和pBluescript II KS（+） phagemid（pBS）质粒电转化到Ampr 的耐药菌TEM-1 和TEM-3 中,测定转化菌的β-内酰胺酶的活力,结果为:Rz-Dz<Rz<Dz<pBS;测定抑菌率,结果为:Rz-Dz>Rz>Dz,表明Rz-Dz 由于切割β-内酰胺酶mRNA 的活力比Rz、Dz 高,而表现出更高的抑制耐药菌生长的能力。证明了Rz-Dz 同时具有RNAzyme 和DNAzyme 的切割β-内酰胺酶mRNA 的活性。