论文摘要
毛细管电泳(capillary electrophresis,CE) 是近年来发展起来的可用于对微量有机化合物、无机离子、中性分子、蛋白质和多肽、DNA 和核酸片段等进行分离分析的实验方法,具有自动化程度高、分离速度快、样品用量少、分离效率高、检测模式多样等特点。本研究采用不同的分离模式,建立了检测微量蛋白质和中药苯并呋喃酮类(benzofuranone) 有效成分的实验方法,并将其应用于相关样品的检测。1 无胶筛分毛细管电泳检测微量蛋白质方法的建立及应用采用非涂层管,以大分子聚乙二醇(polyethlene glycol,PEG)为筛分介质,以无胶筛分毛细管电泳(non-gel sievingcapillary electrophoresis, NGSCE) 模式,建立了一种检测微量蛋白质的方法,并将其用于检测血管平滑肌细胞(vascularsmooth muscle cell, VSMC) 分泌的骨桥蛋白(osteopontin,OPN)。结果如下:1.1 NGSCE 方法的建立以OPN 为检测对象,通过对缓冲体系、筛分介质浓度、分离电压、上样量等分离条件进行优化,取得了良好的分离效果。优化的NGSCE 条件为:非涂层毛细管总长度为57 cm,有效长度为50 cm,内径为75μm;电极缓冲液为150 mmol/L硼酸盐缓冲液(含有40 g/L PEG20000);PDA 检测器,检测波长为214 nm;分离电压23 kV;正极进样,进样量为0.5 psi×5
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