张凯丽:地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用论文

张凯丽:地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用论文

本文主要研究内容

作者张凯丽,孙雨晴,王宇飞,赵虹,郝宇卉,杨丽红,白云,刘志贞(2019)在《地高辛标记Nkx2.1基因RNA探针的制备及应用》一文中研究指出:目的制备地高辛(digoxigenin,DIG)标记的Nkx2. 1基因RNA探针,用于小鼠胚胎早期神经管发育关键时期Nkx2. 1基因表达的检测。方法巢式PCR法扩增Nkx2. 1基因,将其克隆至pGEM-T载体;以其为模板,通过Nkx2. 1特异性引物,PCR扩增RNA探针转录模板;采用T7 RNA聚合酶,制备DIG标记的正义、反义Nkx2. 1 RNA原位杂交探针。经全胚胎原位杂交(whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)技术分析胚胎8. 5、9. 5、10. 5 d小鼠体内Nkx2. 1基因的表达情况。结果制备的探针浓度为1 521. 986 ng/mL,纯度A260/280=2. 39。Nkx2. 1基因反义探针能高效检测到Nkx2. 1基因在胚胎8. 5、9. 5及10. 5 d小鼠神经系统中表达,正义探针未能检测到表达信号。结论成功制备了特异高效的DIG标记的Nkx2. 1基因RNA原位杂交探针,为进一步研究Nkx2. 1基因在小鼠胚胎组织中的表达,探索其在神经管发育中的作用机制奠定了基础。

Abstract

mu de zhi bei de gao xin (digoxigenin,DIG)biao ji de Nkx2. 1ji yin RNAtan zhen ,yong yu xiao shu pei tai zao ji shen jing guan fa yo guan jian shi ji Nkx2. 1ji yin biao da de jian ce 。fang fa chao shi PCRfa kuo zeng Nkx2. 1ji yin ,jiang ji ke long zhi pGEM-Tzai ti ;yi ji wei mo ban ,tong guo Nkx2. 1te yi xing yin wu ,PCRkuo zeng RNAtan zhen zhuai lu mo ban ;cai yong T7 RNAju ge mei ,zhi bei DIGbiao ji de zheng yi 、fan yi Nkx2. 1 RNAyuan wei za jiao tan zhen 。jing quan pei tai yuan wei za jiao (whole-mount in situ hybridization,WM-ISH)ji shu fen xi pei tai 8. 5、9. 5、10. 5 dxiao shu ti nei Nkx2. 1ji yin de biao da qing kuang 。jie guo zhi bei de tan zhen nong du wei 1 521. 986 ng/mL,chun du A260/280=2. 39。Nkx2. 1ji yin fan yi tan zhen neng gao xiao jian ce dao Nkx2. 1ji yin zai pei tai 8. 5、9. 5ji 10. 5 dxiao shu shen jing ji tong zhong biao da ,zheng yi tan zhen wei neng jian ce dao biao da xin hao 。jie lun cheng gong zhi bei le te yi gao xiao de DIGbiao ji de Nkx2. 1ji yin RNAyuan wei za jiao tan zhen ,wei jin yi bu yan jiu Nkx2. 1ji yin zai xiao shu pei tai zu zhi zhong de biao da ,tan suo ji zai shen jing guan fa yo zhong de zuo yong ji zhi dian ding le ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国生物制品学杂志的张凯丽,孙雨晴,王宇飞,赵虹,郝宇卉,杨丽红,白云,刘志贞,发表于刊物中国生物制品学杂志2019年08期论文,是一篇关于基因论文,探针论文,全胚胎原位杂交论文,中国生物制品学杂志2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国生物制品学杂志2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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