三拗芎葶合剂对哮喘大鼠气道炎症影响的实验研究 ——附61例临床观察

论文摘要

第一部分动物实验目的：探讨三拗芎葶合剂对哮喘大鼠肺组织转录因子T-bet,GATA-3及血清中IFN-γ、IL-4的影响。方法：取健康SD大鼠100只,随机分为空白对照组（简称空白组）、哮喘模型组（简称模型组）、三拗芎葶合剂高剂量组（简称高剂量组,下同）、中剂量组、低剂量组、地塞米松组（简称地米组）六组。空白组用生理盐水造模,其余5组大鼠用OVA加氢氧化铝腹腔注射,从第3周起用等量生理盐水（空白组）、1%OVA溶液雾化激发（其余5组）,激发前1h用等量生理盐水（空白组和模型组）、不同浓度三拗芎葶合剂（大、中、小剂量组）灌胃、地塞米松腹腔注射1周（地米组）。3周后处死大鼠取右肺采用RT-PCR法测量肺组织转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA,取血清用ELISA法测量IFN-γ、IL-4浓度。通过肺组织病理切片了解气道炎症改善情况。结果：实验显示模型组GATA-3 mRNA,IL-4浓度明显升高,T-betmRNA、IFN-γ浓度降低,T-betmRNA/GATA-3mRNA. IFN-γ/IL-4比值均下降；空白组、地米组、高剂量组、中剂量组、低剂量组GATA-3 mRNA,IL-4浓度不同程度下降,T-betmRNA. IFN-γ浓度升高T-betmRNA/GATA-3mRNA. IFN-γ/IL-4比值不同程度上升,以高剂量组,地米组效果明显。结论：三拗芎葶合剂能够通过提高大鼠肺组织中T-betmRNA的表达,血清IFN-γ水平、或升高T-betmRNA/GATA-3mRNA、IFN-γ/IL-4比值减轻哮喘大鼠气道炎症,并改善大鼠生存质量。为三拗芎葶合剂治疗哮喘提供了实验依据。第二部分临床观察部分目的：观察三拗芎葶合剂的临床疗效并浅析该方防治哮喘的机理。方法：以61例处于哮喘轻中度慢性持续期,中医辨证属痰瘀阻肺证的患者为对象,随机分为治疗组（三拗芎葶合剂联合80ug/4.5ug信必可都保）和对照组（160ug/4.5ug信必可都保）,观察了两组治疗前后症状改善情况。对两组治疗前后哮喘发作频率、万托林使用次数、单项症状积分、中医症状积分、整体证侯改善积分,ACT评分的各项指标进行了测定。结果：治疗组与对照组治疗前患者年龄、性别、病程、病情轻重、症状积分、哮喘发作频率、万托林的使用次数方面统计结果无显著性差异（P>0.05）,说明两组患者具有可比性。4-8周治疗后两组均能显著患者减少哮喘发作频率；万托林的使用次数,增加ACT评分；统计结果显示两组治疗后疗效无显著性差异（P>0.05）。均能改善患者症状、中医单项症状积分、中医症状积分、中医整体证侯积分统计两组治疗后有显差（P<0.05）,治疗组优于对照组。结论：三拗芎葶合剂能够减少信必可都保的用量,有效改善患者病情,减少患者的哮喘发作频率和万托林的使用次数,减轻气道高反应性,减轻临床症状和体征,提高患者的生命质量,暂没有发现任何毒副作用,可望成为治疗哮喘行之有效的中医疗法。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要（ABSTRACT）
• 目录
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一部分 实验研究
• 1 实验方案摘要
• 2 材料、方法、技术路线、应用方案
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验动物、饲养及分组
• 2.1.2 实验药物及试剂
• 2.1.3 主要设备
• 2.2 实验技术路线及方法
• 2.2.1 实验技术路线
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 肺组织病理形态学检查（石蜡切片HE染色观察气道炎症）操作步骤
• 2.3.1 肺组织的固定及石蜡切片
• 2.3.2 肺组织切片的HE染色步骤
• 2.4 RT—PCR法测肺组织转录因子T-betmRNA,GATA-3mRNA操作步骤
• 2.4.1 主要材料、试剂和主要设备
• 2.4.2 肺脏总RNA提取
• 2.4.3 RNA质量的鉴定
• 2.4.4 cDNA的合成
• 2.4.5 T-betmRNA、GATA-3 mRNA PCR扩增和凝胶电泳分析
• 2.5 血清细胞因子IL-4表达水平的ELISA法测定
• 2.5.1主要设备
• 2.5.2 主要试剂
• 2.5.3 ELISA法检测大鼠血清IL-4实验步骤
• 2.5.4 血清细胞因子IFN-r表达水平的ELISA法测定
• 2.6 图像分析方法
• 3 统计方法
• 4 观察指标
• 4.1 一般情况
• 4.2 各组大鼠存活率统计分析
• 4.3 各组大鼠死亡原因分析
• 4.4 肺组织病理形态学检查
• 5 实验数据
• 5.1 肺组织病理学变化
• 5.2 各组大鼠血浆IFN-γ,IL-4数据
• 5.3 各组大鼠肺T-betmRNA,GATA-3mRNA数据
• 6 实验结果
• 6.1 一般情况比较
• 6.2 大鼠肺组织HE染色结果
• 6.3 血清IFN-γ、IL-4及IFN-Y/IL-4比值比较
• 6.4 肺组织T-betmRNA、GATA-3mRNA及T—betmRNA/GATA-3mRNA比值比较
• 7 结论
• 8 讨论
• 8.1 痰瘀的病理实质与气道炎症
• 8.2 宣肺逐瘀化痰法对支气管哮喘气道炎症作用机理研究
• 8.2.1 立法依据
• 8.2.2 三拗芎葶合剂的组方及用药特点
• 8.3 关于哮喘动物模型的选择
• 8.4 关于实验动物一般情况和肺组织病理切片的讨论
• 8.5 三拗芎葶合剂对哮喘大鼠Thl、Th2细胞特征性细胞因子IFN—y、IL—4的影响
• 8.6 对肺组织转录因子T—betmRNA、GATA—3mRNA及T—betmRNA/GATA—3mRNA比值的影响
• 第二部分 临床观察部分
• 1 试验方案摘要
• 2 研究对象
• 2.1 病例来源
• 2.2 病例选择
• 2.2.1 纳入标准
• 2.2.2 中医诊断标准
• 2.3 入选病例标准
• 2.3.1 病例纳入标准
• 2.3.2 排除标准
• 2.3.3 剔除病例标准
• 2.3.4 中止和撤除病例标准
• 3 研究方法
• 3.1 分组方法
• 3.2 治疗方法临床研究
• 3.2.1 给药方法
• 3.2.2 观测指标
• 3.3 观察指标及评价标准
• 3.3.1 中医征候评分标准
• 3.3.2 哮喘控制评估工具
• 4 统计学处理
• 5 统计结果
• 5.1 患者一般资料比较
• 5.2 两组治疗前后中医单项症状积分比较
• 5.3 两组治疗前后中医症状、中医整体证侯改善积分比较见表
• 5.4 两组治疗前后哮喘发作频率（次/周）、万托林使用次数（次/d）比较
• 5.5 两组患者4,8周ACT评分结果比较
• 5.6 两组治疗8周后中医证侯疗效比较
• 6 结果
• 6.1 患者治疗前年龄、性别、病程、病情轻重比较分析
• 6.2 单项症状积分、中医症状积分、中医整体证侯积分分析
• 6.3 哮喘发作频率、万托林使用次数分析
• 6.4 两组患者4周、8周ACT评分分析
• 6.5 两组治疗8周后中医证侯疗效分析
• 7 结论
• 8 讨论
• 8.1 关于临床观察有效性评价
• 8.2 关于患者的教育和管理方法
• 8.3 关于信必可维持和缓解（SMART）疗法
• 8.4 关于哮喘治疗前景,问题与展望
• 小结
• 综述一 祖国医学对支气管哮喘的认识
• 综述二 西医学对支气管哮喘的认识
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 附件1 在读期间公开发表的学术论文