论文摘要
前言ABCE1基因属ATP结合盒转运子基因亚家族成员之一，其编码的ABCE1蛋白的结构中含有一个N端的Fe-S区和两个核酸结合区，文献报道ABCE1是一种高度保守的蛋白，在所有的真核及原核生物中都有一到两种转录本普遍表达。ABCE1蛋白最初被发现能够特异性结合并抑制哺乳动物细胞内一种被干扰素诱导的核糖核酸酶L，因此又名为核糖核酸酶L抑制因子，之后的研究表明它在HIV、SIV病毒限制性多肽的聚集方面也发挥着必须的作用。最近在酵母中的研究显示，ABCE1蛋白参与了细胞分裂及蛋白质翻译起始复合物的形成，同样证实，人类ABCE1通过与翻译起始因子eIF2和eIF5的结合从而在mRNA翻译的起始过程中发挥着必不可少的作用。实验表明，在人类细胞系中抑制ABCE1蛋白的表达可以改变核糖体形态，使核糖体大亚基数量下降而80S多聚核糖体数量增加，从而使细胞内蛋白质翻译过程受到抑制。众所周知，肿瘤细胞的蛋白翻译过程异常亢进，许多参与翻译过程的蛋白因子如核糖体蛋白S6激酶，mTOR和4E-BP1等都已成为肿瘤干预治疗的分子靶点。体外实验表明，抑制ABCE1表达能有效抑制人类肿瘤细胞的生长。因此，相信在肿瘤细胞中通过抑制ABCE1蛋白的表达可能会有效遏制肿瘤的进展。然而，关于ABCE1的大多数研究都局限于动物模型或体外细胞系，在人类组织尤其是肺癌组织中的表达情况罕有报道。我们之前在筛选肺癌转移相关基因的研究中发现了与此基因高度同源的侯选基因片段，这提示我们，对ABCEl的深入研究有可能会发现它在参与恶性肿瘤，尤其是肺癌的发生及进展等方面的重要作用。本研究的目的在于通过检测人肺腺癌组织中ABCE1蛋白及mRNA的表达来明确其在人类肺癌的发生及进展过程中的作用。实验方法本实验采集48例临床手术切除的人肺腺癌组织标本以及距离肿瘤5厘米以上的癌旁对照肺组织标本，送大体病理学检查后标本分割为两部分，一部分立即置液氮内速冻，-70℃贮存，用以Western Blot及RT-PCR方法检测：另一部分以10％中性福尔马林浸泡固定，用以免疫组织化学实验。结果ABCE1蛋白及mRNA在人肺腺癌组织与正常对照肺组织中表达量有显著性差异。在人肺腺癌组织中RT-PCR方法检测ABCE1 mRNA的相对表达量为1.91±0.23，Western Blot方法检测ABCEl蛋白的相对表达量为246.64±56.7，在正常对照肺组织中ABCE1 mRNA的相对表达量为1.11±0.16，ABCE1蛋白的相对表达量为99.36±18.79，在两种组织中相对表达量差异具有显著统计学意义（P＜0.05），而且，ABCE1基因在肺腺癌组织中的过度表达与肿瘤病理分期相关，其中在Ⅲ期肺癌组中的表达明显强于Ⅰ期和Ⅱ期，在不同分化程度肺癌组中的表达没有明确统计学差异。在肺腺癌组织石蜡切片的免疫组织化学染色结果表明，ABCE1蛋白表达主要定位于肿瘤细胞浆。结论人肺腺癌ABCE1蛋白阳性表达物质定位于细胞浆。人肺腺癌组织中ABCE1蛋白和mRNA的表达水平上调，这种表达上调与肺腺癌的发生及临床病理分期密切相关，ABCE1可能参与了肺腺癌的发生及进展过程。