李兴芬:青杄PwPEBP基因及其启动子序列的克隆与表达分析论文

李兴芬:青杄PwPEBP基因及其启动子序列的克隆与表达分析论文

本文主要研究内容

作者李兴芬,苗雅慧,孙永江,张孟娟,张凌云(2019)在《青杄PwPEBP基因及其启动子序列的克隆与表达分析》一文中研究指出:【目的】通过研究青杄中的PwPEBP基因及其启动子的表达特性及生物学功能,探究PEBP基因在植物生长发育过程中响应逆境胁迫的功能及作用机制。【方法】本研究从青杄转录组测序中获得PwPEBP的c DNA序列,利用TMHMM、GOR4等在线软件对PwPEBP蛋白进行生物信息学分析,以此为基础通过PCR技术克隆得到PwPEBP开放阅读框(ORF)序列;同时对其在不同组织与不同逆境及激素处理中的表达水平进行了RT-qPCR技术分析;采用染色体步移法克隆PwPEBP的启动子序列,并利用在线软件BDGP和PlantCARE对PwPEBP启动子序列进行基础启动子区域、转录起始位点和顺式作用元件的预测;最后通过农杆菌瞬时转化烟草法验证PwPEBP启动子的功能。【结果】PwPEBP cDNA长度为1 408 bp,开放阅读框共585 bp,编码194个氨基酸。PwPEBP蛋白分子式为C966H1 484N250O299S6,无信号肽和跨膜结构域,为亲水蛋白,含有25个磷酸化位点;进化树分析显示,PwPEBP蛋白与北美云杉的PEBP单独聚成一簇,属于新的PEBP蛋白。组织特异性分析显示,PwPEBP在成熟叶中表达量最高,嫩叶中表达量最低;PwPEBP在各激素及逆境诱导下均有表达,但对盐处理无响应。克隆的PwPEBP启动子序列长度为903 bp,其具有响应GA、ABA、SA、MeJA的顺式作用元件。GUS染色及Luc定量实验显示,PwPEBP启动子均能响应GA、ABA、MeJA和SA外源激素及干旱、高温、低温等逆境胁迫。【结论】青杄中PwPEBP基因广泛响应干旱、低温、高温等非生物胁迫,其中对干旱胁迫最为敏感,同时还参与了ABA、GA、MeJA和SA激素的信号通路。

Abstract

【mu de 】tong guo yan jiu qing qian zhong de PwPEBPji yin ji ji qi dong zi de biao da te xing ji sheng wu xue gong neng ,tan jiu PEBPji yin zai zhi wu sheng chang fa yo guo cheng zhong xiang ying ni jing xie pai de gong neng ji zuo yong ji zhi 。【fang fa 】ben yan jiu cong qing qian zhuai lu zu ce xu zhong huo de PwPEBPde c DNAxu lie ,li yong TMHMM、GOR4deng zai xian ruan jian dui PwPEBPdan bai jin hang sheng wu xin xi xue fen xi ,yi ci wei ji chu tong guo PCRji shu ke long de dao PwPEBPkai fang yue dou kuang (ORF)xu lie ;tong shi dui ji zai bu tong zu zhi yu bu tong ni jing ji ji su chu li zhong de biao da shui ping jin hang le RT-qPCRji shu fen xi ;cai yong ran se ti bu yi fa ke long PwPEBPde qi dong zi xu lie ,bing li yong zai xian ruan jian BDGPhe PlantCAREdui PwPEBPqi dong zi xu lie jin hang ji chu qi dong zi ou yu 、zhuai lu qi shi wei dian he shun shi zuo yong yuan jian de yu ce ;zui hou tong guo nong gan jun shun shi zhuai hua yan cao fa yan zheng PwPEBPqi dong zi de gong neng 。【jie guo 】PwPEBP cDNAchang du wei 1 408 bp,kai fang yue dou kuang gong 585 bp,bian ma 194ge an ji suan 。PwPEBPdan bai fen zi shi wei C966H1 484N250O299S6,mo xin hao tai he kua mo jie gou yu ,wei qin shui dan bai ,han you 25ge lin suan hua wei dian ;jin hua shu fen xi xian shi ,PwPEBPdan bai yu bei mei yun sha de PEBPchan du ju cheng yi cu ,shu yu xin de PEBPdan bai 。zu zhi te yi xing fen xi xian shi ,PwPEBPzai cheng shou xie zhong biao da liang zui gao ,nen xie zhong biao da liang zui di ;PwPEBPzai ge ji su ji ni jing you dao xia jun you biao da ,dan dui yan chu li mo xiang ying 。ke long de PwPEBPqi dong zi xu lie chang du wei 903 bp,ji ju you xiang ying GA、ABA、SA、MeJAde shun shi zuo yong yuan jian 。GUSran se ji Lucding liang shi yan xian shi ,PwPEBPqi dong zi jun neng xiang ying GA、ABA、MeJAhe SAwai yuan ji su ji gan han 、gao wen 、di wen deng ni jing xie pai 。【jie lun 】qing qian zhong PwPEBPji yin an fan xiang ying gan han 、di wen 、gao wen deng fei sheng wu xie pai ,ji zhong dui gan han xie pai zui wei min gan ,tong shi hai can yu le ABA、GA、MeJAhe SAji su de xin hao tong lu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自北京林业大学学报的李兴芬,苗雅慧,孙永江,张孟娟,张凌云,发表于刊物北京林业大学学报2019年04期论文,是一篇关于青杄论文,启动子论文,基因表达论文,胁迫响应论文,北京林业大学学报2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自北京林业大学学报2019年04期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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