硫化氢对大鼠结肠平滑肌细胞的舒张作用及机制的研究

论文摘要

目的:本课题旨在研究硫化氢（H2S）对离体单个结肠平滑肌细胞舒缩作用的影响;并进一步研究H2S对结肠平滑肌细胞的舒缩作用是否通过改变ATP敏感钾离子通道(KATP通道)的活性引起,从而探讨H2S调节胃肠道动力的机制。方法:制备Wister大鼠单个结肠平滑肌细胞悬液。用H2S供体硫氢化钠（NaSH）,NaSH+KATP通道抑制剂格列本脲（Gli）,KATP通道开放剂吡那地尔（Pin）处理大鼠结肠平滑肌细胞,在倒置相差显微镜下观察,应用图象分析系统测量细胞长轴的长度,观察药物对细胞舒缩作用的影响。结果:1.NaSH组作用时间为60s组的细胞平均长度大于作用时间为30、120s组（P＜0.05）并大于对照组（P＜0.05）,其细胞舒张量值为20.48%。故后期实验中均选用60s作为药物反应时间。2.1×10-5、1×10-4和1×10-3mol/L NaSH组的细胞平均长度均大于对照组（P＜0.05）。其中1×10-4和1×10-3mol/L NaSH组的细胞平均长度大于1×10-5mol/L NaSH组（P＜0.05）;而1×10-4和1×10-3mol/L NaSH组之间的细胞平均长度无统计学差异（P＞0.05）。3.NaSH+1×10-6mol/L Gli,NaSH+1×10-5mol/L Gli,NaSH+1×10-4mol/L Gli和NaSH+1×10-3mol/L Gli 4组的细胞平均长度均小于NaSH+PBS组（P＜0.05）,大于PBS+PBS组（对照组）（P＜0.05）。其中Gli在1×10-6mol/L至1×10-4mol/L范围内其浓度与细胞平均长度呈负相关趋势,即随着Gli浓度增加细胞平均长度逐渐减少（P＜0.05）;而NaSH+1×10-4mol/L Gli和NaSH+1×10-3mol/L Gli组之间的细胞平均长度无统计学差异（P＞0.05）。4.1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L Pin组的细胞平均长度较对照组增加（P＜0.01）,且随着Pin浓度的增加,细胞平均长度增加。结论:1.NaSH可以产生细胞舒张作用。在作用时间为60s时,其舒张作用最明显;且NaSH的细胞舒张作用具有一定的剂量依赖性,即在一定剂量范围内其舒张作用随浓度的增加而增强。2.Gli可以减弱NaSH(1×10-4mol/L)对细胞的舒张作用,并具有一定的剂量依赖性;但Gli不能完全阻断NaSH的细胞舒张作用。3.Pin可以和NaSH一样产生细胞舒张作用。4.本研究提示H2S可以对Wister大鼠离体单个结肠平滑肌细胞产生舒张作用,激活KATP通道可能是H2S舒张细胞的作用机制之一,由此推测H2S可能作为一种气体信号分子参与调节胃肠动力作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 硫化氢与胃肠道疾病关系的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢