柳蒿芽多糖的提取、分离纯化及结构研究

论文摘要

柳蒿芽（Artemisin selengensis）为菊科多年生草本植物,可食用,亦可全草入药,幼嫩的上部茎叶可作为一种营养蔬菜食用。经研究发现其有清热凉血、清热利湿、清热利尿、降脂、降压及降糖等作用。对感冒发烧、胃肠不适、肝炎、肝硬化腹水、高血脂、高血压、糖尿病等均有特殊的疗效和防治作用。本文以柳蒿芽干品为原料,利用现代实验室分析手段,对柳蒿芽多糖的提取方法、分离纯化、理化性质、结构特征进行了研究,主要的实验结果如下:1、采用水提醇沉的方法从柳蒿芽中提取水溶性多糖。分别采用水提法和微波辅助法提取多糖。水提法最佳工艺条件:90℃提取3h,料液比为1:30,得率为7.87%;微波辅助提取法最佳工艺条件:功率是480W,料液比是25:1,时间是15min,得率为8.22%。与传统的水提法,微波提取法最大的优点是提高产率,明显的缩短提取时间。2柳蒿芽多糖的最佳脱蛋白方法是Sevag法（氯仿:正丁醇=5:1）,即Sevag试剂用量为多糖浓缩液体积的1/5。柳蒿芽最佳的脱色方法是双氧水脱色法,最佳的脱色条件:双氧水的用量为多糖溶液的75%,水温40℃,时间4h,pH9.0。此工艺下多糖溶液的脱色率为63.80%。3柳蒿芽多糖经过除蛋白和脱色,除去小分子杂质,为精品的柳蒿芽多糖（PSWP）,经DEAE-52离子交换层析的分离纯化,得到了3个级分,分别为PSWP-1、PSWP-2和PSWP-3,经过SephadexG-100凝胶过滤和高效液相色谱鉴定均为单一组分。4柳蒿芽多糖的3个级分的相对分子质量分别为1.1513×105Dal、1.2491×105Dal、1.1663×105Dal。各组分完全水解后,薄层层析和高效液相色谱法确定:PSWP-1由鼠李糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.000:1.703;PSWP-2由葡萄糖一种单糖组成:PSWP-3由鼠李糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.000:2.189。经红外光谱对PSWP-1、PSWP-2和PSWP-3三组分进行结构分析,确定3个组分均为β-构型糖苷键相连的吡喃环多糖。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 多糖的研究概况
• 1.2 多糖的分离纯化
• 1.2.1 多糖的提取
• 1.2.2 多糖的分离
• 1.2.3 多糖的纯化
• 1.2.4 多糖纯度的鉴定
• 1.2.5 多糖含量的测定
• 1.2.6 多糖的结构分析
• 1.2.7 多糖结构的测定
• 1.3 植物多糖的生物活性
• 1.3.1 免疫调节、抗肿瘤活性
• 1.3.2 降血糖作用
• 1.3.3 抗氧化作用
• 1.3.4 抗病毒活性
• 1.3.5 其它的活性
• 1.4 本课题的研究意义和内容
• 2 柳蒿芽多糖提取工艺的研究
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 试验仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 原料预处理
• 2.2.2 多糖提取的工艺流程
• 2.2.3 多糖含量的测定方法
• 2.2.4 热水浸提法
• 2.2.5 微波辅助提取法
• 2.2.6 数据处理
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 多糖含量标准曲线的测定
• 2.3.2 热水浸提法的分析结果
• 2.3.3 微波辅助提取法的分析结果
• 2.3.4 两种提取方法的比较
• 2.4 本章小结
• 3 柳蒿芽多糖的分离纯化
• 3.1 试验材料
• 3.1.1 原料
• 3.1.2 试剂
• 3.1.3 实验仪器
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 试验工艺流程
• 3.2.2 除蛋白
• 3.2.3 脱色
• 3.2.4 DEAE-52离子交换层析
• 3.2.5 纯度鉴定
• 3.2.6 数据处理
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 蛋白质及多糖含量的测定
• 3.3.2 三种除蛋白方法的比较
• 3.3.3 脱色
• 3.3.4 DEAE-52离子交换层析
• 3.3.5 纯度鉴定
• 3.4 本章小结
• 4 柳蒿芽多糖结构的特征分析
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试剂
• 4.1.3 仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 基本理化性质的分析
• 4.2.2 相对分子量的测定
• 4.2.3 单糖组成分析
• 4.2.4 光谱测定
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 基本理化性质分析
• 4.3.2 相对分子量的测定
• 4.3.3 单糖组成分析
• 4.3.4 光谱分析
• 4.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢