人间充质干细胞体外分化为神经样细胞的研究

论文摘要

神经细胞的再生能力差,临床上对于神经系统损伤后修复以及一些退行性病变的治疗效果一直不够理想。细胞移植是修复损伤的一种有效的方法。神经干细胞作为神经系统修复的细胞学基础,已成为中枢神经系统疾病和损伤修复的研究焦点。目前,胚胎神经干细胞已用于帕金森氏病、缺血性疾病等神经系统疾病的治疗,但面临着伦理、来源、免疫排斥等多方面的问题。而对干细胞可塑性的新认识,使细胞移植的研究不止只局限于神经干细胞。目前发现干细胞的分化不一定限于其所在的胚层,具有“横向分化”或“跨系分化”（transdifferentiation）的能力,骨髓及脐血间充质细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）就是很典型的例子,它们来源于中胚层,在体外却可以分化为中胚层和神经外胚层来源的组织细胞,如成骨细胞、脂肪细胞和神经细胞等,在组织工程和细胞治疗等方面具有广阔应用前景。中药丹参注射液（Salvia miltiorrhiza）是一个中药现代方剂,由丹参、三七和冰片组成,具有活血、化瘀,理气止痛的功效,是临床治疗冠心病、胸闷、心绞痛的常用中药。有研究发现,丹参对神经细胞有保护作用,对神经细胞的凋亡有明显的抑制作用。本研究探讨MSCs体外纯化、扩增及丹参注射液作为神经诱导剂在MSCs分化为神经细胞的作用。 第一部分 目的:探讨人骨髓及脐血不同来源MSCs体外培养纯化、体外扩增及保存方法,为细胞诱导分化提供细胞来源。方法:骨髓来自需做骨穿患者（结果已排除肿瘤性疾病）,年龄5-14岁,脐血来自足月分娩的母婴均健康的供者。骨髓和脐血用DMEM（Dulbecco’s modified Eagle’s medium）稀释后,按常规分离方法Ficoll密度梯度离心制各单个核细胞MNC（mononuclear cell）,种植于含10%FBS（fetal bovine Serum）的DMEM培养体系,

论文目录

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• 前言
• 第一部分 人间充质干细胞体外培养、扩增、冻存与复苏
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 丹参诱导人间充质干细胞体外向神经细胞分化的研究材料和方法
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 致谢