论文题目: TRAIL内皮祖细胞导向对人卵巢上皮性癌治疗初探
论文类型: 博士论文
论文专业: 妇产科学
作者: 周莉
导师: 丰有吉,金惠铭,孙红,朱铭伟
关键词: 卵巢肿瘤,基因治疗,凋亡,内皮祖细胞,脐血,细胞,祼鼠皮下移植瘤
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL)是TNF家族成员中的一员,TRAIL分子能够特异性地诱导多种组织来源的肿瘤细胞凋亡,而不影响正常组织和细胞的功能,因而具有较好的临床应用前景。 应用TRAIL进行肿瘤的基因治疗可以说是一个很有潜力的途径。因为体外实验发现,携带TRAIL基因的腺病毒转染的肿瘤细胞不但可以诱导其自身的凋亡,还可以通过旁路效应诱导未转染的肿瘤细胞的死亡。 一些实验提示内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cell, EPC)在体内能定向归巢于肿瘤,参与肿瘤新生血管的建立。利用这一点,将EPC偶联抑制血管发生因子或其它抗肿瘤药物或转染抑癌基因可抑制肿瘤的生长,可能是治疗肿瘤的有效方法。 本文分以下几个步骤进行研究: 1.TRAIL对卵巢癌细胞的促凋亡作用 目的 分析重组人TRAIL蛋白诱导卵巢癌细胞3AO的凋亡作用。方法MTT法观察不同浓度人可溶性TRAIL对卵巢癌细胞3AO的直接细胞毒作用,ANNEXIN V-FITC染色流式细胞仪检测凋亡率。结果25~100 ng/ml的重组人TRAIL蛋白可诱导卵巢癌细胞3AO发生凋亡,且随着浓度增高,凋亡率呈上升趋势。结论 重组人TRAIL蛋白可诱导卵巢癌细胞3AO的凋亡,凋亡率与TRAIL蛋白的浓度呈正相关。 2.脐血EPC的分离、培养及鉴定 目的 研究脐血中EPC的分离方法、培养扩增条件及鉴定其表面标志。为进一步对卵巢癌的基因治疗提供足够数量的载体。方法 用CD133+分离试剂盒从脐血中分离CD133+细胞,在体外诱导扩增16天后,通过免疫组化ABC染色、荧光显微镜、电镜、流式细胞仪检测鉴定细胞性质。结果 从脐血中分离的CD133+细胞可诱导出EPC,表现为表达内皮细胞标志,并最终能分化为成熟内皮细胞形成管腔样结构。结论脐血CD133+细胞能诱导出EPC,在体外培养能分化为成熟内皮细胞。
论文目录:
英文缩写
中文摘要(关键词)
英文摘要(关键词)
前言
第一部分 TRAIL对卵巢癌细胞的促凋亡作用
主要材料
方法
结果
讨论
第二部分 EPC的分离、培养及鉴定
主要材料
方法
结果
讨论
第三部分 GFP-hTRAIL融合基因表达载体的构建及转染卵巢癌细胞结果
材料与方法
结果
讨论
第四部分 TRAIL质粒电穿孔及脂质体转染EPC效率的比较
主要材料
方法
结果
讨论
第五部分 转染TRAIL质粒后EPC培养上清对3AO卵巢癌细胞的体外杀伤作用
材料与方法
结果
讨论
第六部分 转染TRAIL质粒后EPC对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用
材料与方法
结果
讨论
小结
参考文献
综述
研究生期间撰写和发表的文章
致谢
论文独创性声明
发布时间: 2005-09-19
参考文献
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- [2].TRAIL及其受体在卵巢癌细胞凋亡中的作用[D]. 李春梅.四川大学2005
- [3].TRAIL及其受体在宫颈癌细胞凋亡中的作用[D]. 宋改环.吉林大学2006
- [4].TRAIL对HeLa生物活性及其作用机理的初步研究[D]. 赖国旗.重庆医科大学2006
- [5].TRAIL真核质粒联合紫杉醇抗宫颈癌的体内外实验研究[D]. 孙晓杰.吉林大学2007
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