SARSCoV灭活疫苗对恒河猴的免疫原性、保护性与安全性研究

论文摘要

目的: 建立SARS相关冠状病毒感染恒河猴动物模型,并用该模型评价一种实验性SARS冠状病毒灭活疫苗免疫原性、保护性与安全性,同时也为该疫苗进一步完善及投入临床试验提供理论和实验依据。 方法: 动物免疫分3组,分别为肌肉注射0.5μg、5μg、50μg疫苗组及磷酸盐缓冲液（PBS）对照组,同时设超大剂量（5000μg）观察疫苗安全性。于初次免疫后7天再次以同等剂量加强免疫,0.5μg、5μg、50μg剂量组和阳性对照组于免疫后22天接受SARS相关冠状病毒的攻击,并在攻毒后15天处死所有动物。观察免疫和攻毒前后动物临床症状和生化指标的改变。ELISA检测IgG和IgA抗体,观察不同动物组IgG的变化和鼻咽部IgA分泌情况,了解动物体液免疫和粘膜免疫的情况。双抗体夹心ELISA试剂盒定量分析恒河猴血清IL-4和IFN-γ水平。采用病毒分离、免疫荧光、光镜及RT-PCR方法对实验动物不同时间、不同组织或分泌物进行检测。病理切片了解免疫和攻毒前后动物脏器的改变。 结果: 1.血清IgG抗体反应:大部分免疫猴在初次免疫7天后产生较高IgG滴度（>100）,高剂量组呈现高水平抗体滴度（≥1600）,随疫苗剂量的升高,免疫应答亦增强。 2.粘膜免疫:肌肉接种引起的粘膜抗体反应,12只免疫动物中有5只（41.7%）表达SARS-CoV特异性分泌型IgA抗体。 3.细胞因子评价:初次免疫后,5μg,50μg疫苗组动物血清中IFN-γ显著增加,明显高于免疫前水平（P<0.05和0.01）,再次免疫后继续增加。0.5μg剂量组动物仅在再次免疫后IFN-γ显著升高（P<0.05）,而PBS组无明显变化。三个实验组及对照组IL-4水平在免疫前后均无显著变化。 4.血清中和抗体效价:在初次免疫后14天,三个免疫组出现不同水平针对SARS-CoV的中和抗体,同时随着疫苗剂量的增加,中和抗体滴度也升高。 5.组织病理学检查:各免疫组及阴性对照动物及肺部、肝脏、肾脏病理检查均未发现异常,而阳性对照动物肺部及肝脏病理学检查均发现异常变化。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、引言
• 四、正文
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 五、综述
• 正文
• 参考文献
• 六、后 记