人参皂苷Rb1/Rg1延缓快速老化小鼠P8（SAMP8）肝脏衰老的实验研究

论文摘要

目的:明确快速老化小鼠P8（senescence-accelerated mouseProne8,SAMP8）做为肝脏衰老动物模型的可行性,研究人参皂苷Rg1或Rb1（ginsenoside Rg1/Rb1）是否具有延缓肝脏衰老的作用及其可能机制。方法:以6月龄雄性SAMP8为研究对象,并以生命过程正常的同月龄的抗快速老化小鼠SAMR1（senescence-accelerated mouse Resistance 1,SAMR1）为模型对照。将小鼠随机分为8组:SAMR1组、SAMP8组、SAMP8 Rg1给药组（2.5、5.0、10mg/kg/d 3个剂量组）、SAMP8 Rb1给药组（2.5、5.0、10mg/kg/d 3个剂量组）,每组8只,给药组分别予不同剂量的Rg1、Rb1每日1次腹腔注射,SAMR1组和SAMP8组予生理盐水每日1次腹腔注射,连续3个月。光镜下观察SAMR1组和SAMP8组小鼠肝脏组织病理学改变,组织化学染色法测定衰老相关β-半乳糖苷酶活性,化学比色法测定肝组织匀浆中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性,以明确SAMP8做为肝脏衰老动物模型的可行性;同时观察不同剂量的人参皂苷Rg1和Rb1给药后对SAMP8肝脏上述指标的影响,并通过逆转录—聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫组织化学法检测肝组织血红素氧合酶—1（HO-1）的表达和分布,探讨Rg1和Rb1对衰老肝脏作用的可能机制。结果:与SAMR1组比较,SAMP8组出现皮毛粗糙脱落无光泽、眼周炎症、脊柱弯曲、行动迟缓等老化外观;光镜下可见肝细胞广泛的脂肪变性、局灶性坏死及炎症细胞浸润等退行性改变;肝组织衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞明显增多（P＜0.001）;肝脏匀浆SOD、CAT、GSH-PX活力明显降低（SOD P＜0.001,CAT P＜0.01,GSH-PX P＜0.05）,MDA含量明显增高（P＜0.001）,说明SAMP8肝脏的改变符合衰老肝脏的特点。与SAMP8组比较,不同剂量Rg1和Rb1给药组上述指标均有不同程度改善:肝细胞脂肪变性、局灶性坏死及炎症细胞浸润程度随Rg1或Rb1剂量的增大逐渐减轻;肝组织衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞均为10mg/kg/d组显著减少（Rg1 P＜0.001,Rb1 P＜0.05）;不同剂量Rg1或Rb1给药后肝脏匀浆SOD、CAT、GSH-PX活力与SAMP8组相比均明显升高（P＜0.05）,MDA含量均明显降低（P＜0.05）,其中Rg1以10mg/kg/d组、Rb1以5mg/kg/d组改善趋势最明显,但与其它剂量组无统计学差异。检测肝组织HO-1的表达和分布,发现SAMR1组肝组织仅在肝窦中少许细胞有HO-1表达,而在SAMP8组肝实质细胞呈弥漫性棕黄色强表达,两者存在显著性差异（P＜0.001）,并且SAMP8组的HO-1 mRNA的表达也较SAMR1组明显增强（P＜0.01）。Rg1和Rb1均可抑制肝脏HO-1的蛋白表达和mRNA表达,其中Rg15mg/kg/d组和10mg/kg/d组与SAMP8组相比均有显著意义（P＜0.05）,以10mg/kg/d组作用最佳（P＜0.01）;Rb1同样以5mg/kg/d组和10mg/kg/d组与SAMP8组相比有显著性差异（均为P＜0.05）,但两个剂量组之间无统计学差异（P＞0.05）。结论:1.SAMP8肝脏的病理学改变符合肝脏衰老的特点,氧化应激和脂质过氧化反应可能是SAMP8肝脏衰老改变的一个重要原因。2.人参皂苷Rg1或Rb1具有延缓肝脏衰老的作用,其作用机制可能与提高体内抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化反应、降低肝脏HO-1的表达有关。

论文目录

• 一、英文缩略词表
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、前言
• 五、第一部分:快速老化小鼠P8（SAMP8）肝脏的衰老改变
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 六、第二部分:人参皂苷Rb1/Rg1延缓SAMP8小鼠肝脏衰老的实验研究
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 七、结论
• 八、参考文献
• 九、综述
• 十、致谢
• 十一、个人简历