Ghrelin及其基因在不同时期小鼠卵巢和子宫的定位研究

论文摘要

Ghrelin又名生长素，是神经肽的一种。经研究表明主要分布在动物的脑和胃、肠内，又名脑肠肽。为了探讨Ghrelin在动物生殖调控中的作用，本试验通过免疫组化技术确定Ghrelin在小鼠青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期卵巢和子宫的定位，通过原位杂交技术明确Ghrelin mRNA在小鼠青春期、妊娠期、哺乳期及泌乳后期卵巢和子宫上的分布。试验结果显示，(1) Ghrelin在上述四个生理时期小鼠卵巢中均有表达，Ghrelin免疫阳性细胞主要分布于青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢的卵母细胞、间质细胞、髓质和黄体细胞上。但表达强度和分布范围不同，妊娠期黄体与哺乳期的卵巢髓质Ghrelin阳性细胞呈强阳性表达；妊娠期的小鼠卵巢的生殖上皮也出现阳性表达。统计学分析结果表明青春期的免疫阳性细胞均值显著低于妊娠期8d和哺乳期18d (P<0.05)；妊娠期8d的免疫阳性细胞均值显著低于哺乳期18d及泌乳后期(P<0.05)；哺乳期7d的免疫阳性细胞均值显著低于哺乳期18d (P<0.05)；哺乳期18d的阳性细胞均值显著高于泌乳后期(P<0.05)；青春期的灰度值显著高于妊娠期和哺乳期(P<0.05)；妊娠期的灰度值显著低于泌乳后期(P<0.05)；哺乳期的灰度值显著低于泌乳后期(P<0.05)。(2) Ghrelin mRNA在上述四个生理时期小鼠卵巢中均有表达，Ghrelin mRNA阳性细胞主要分布于青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢的卵母细胞,间质细胞,黄体和髓质上。但在妊娠期小鼠卵巢黄体和泌乳后期卵巢髓质上均出现强阳性表达。经统计学分析可见妊娠期免疫阳性细胞数显著高于青春期和泌乳后期(P<0.05)；哺乳期免疫阳性细胞数与青春期显著高于泌乳后期(P<0.05)；青春期灰度值显著高于妊娠期和哺乳期(P<0.05)。(3) Ghrelin在上述四个生理时期小鼠子宫中均有表达，Ghrelin阳性细胞主要分布于小鼠子宫浆膜下层结缔组织，固有层，基底细胞和间皮细胞上。在妊娠期和哺乳期子宫单层柱状上皮也有表达。经分析发现妊娠期的阳性细胞均值显著高于青春期、哺乳期及泌乳后期(P<0.05)；泌乳后期的阳性细胞均值显著低于与青春期、妊娠期及哺乳期(P<0.05)；妊娠期的灰度值显著低于青春期、哺乳期及泌乳后期(P<0.05)。(4) Ghrelin mRNA在上述四个生理时期小鼠子宫中均有表达，G hrelin mRNA主要分布于小鼠子宫浆膜下层结缔组织，固有层，基底细胞和间皮细胞上。Ghrelin mRNA在固有层出现强阳性表达。通过分析发现妊娠期阳性细胞均值显著高于青春期，妊娠期和哺乳期(P<0.05)；青春期的灰度值显著高于妊娠期和哺乳期(P<0.05)；妊娠期灰度值显著低于哺乳期和泌乳后期(P<0.05)。根据结果得出结论：Ghrelin及其mRNA在四个生理时期小鼠卵巢和子宫上均有表达，且在妊娠期出现强阳性表达，本结果揭示Ghrelin可能在小鼠不同生理时期，尤其是妊娠期有一定的调节作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 主要图表
• 英文缩写中文对照
• 文献综述
• 1 Ghrelin 的概述
• 2 Ghrelin的生物学作用
• 3 结语
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 试验动物
• 1.1.2 试验试剂
• 1.1.3 溶液的配置
• 1.1.4 试验设备
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 试验动物的处理
• 1.2.2 组织切片的制作
• 1.2.3 免疫组织化学步骤
• 1.2.4 地高辛标记的 Ghrelin 寡核苷酸探针序列
• 1.2.5 切片的原位杂交检测
• 1.2.6 观察并拍照
• 1.2.7 统计学处理
• 2 结果与分析
• 2.1 Ghrelin 在不同生理时期小鼠卵巢中的定位
• 2.2 Ghrelin mRNA 在不同生理时期小鼠卵巢中的定位
• 2.3 Ghrelin 在不同生理时期小鼠子宫中的定位
• 2.4 GhrelinmRNA 在不同生理时期小鼠子宫中的定位
• 3 讨论
• 3.1 Ghrelin 在不同生理时期小鼠卵巢中的定位
• 3.2 Ghrelin mRNA 在不同生理时期小鼠卵巢中的定位
• 3.3 Ghrelin 在不同生理时期小鼠卵巢中的定位
• 3.4 Ghrelin mRNA 在不同生理时期小鼠子宫中的定位
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介