幽门螺旋杆菌感染的细胞免疫应答及与胃癌关系的研究

论文摘要

目的： 1983年澳大利亚学者Marshall和Warren在受检者中培养出同一种能产生大量尿素酶的细菌即幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，HP)，二位学者因此伟大发现而于2005年获得诺贝尔医学或生理学奖。HP是定植于胃黏膜表面与胃黏膜层之间的微需氧菌，大量研究表明它是胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，并且与胃癌的发生有关。1994年，WHO将其定为Ⅰ类致癌危险因素。许多研究发现，急性期感染、慢性胃炎、胃溃疡患者机体免疫应答以Th1免疫应答为主。另有实验证明，胃癌患者机体免疫应答以Th2为主。本研究从临床表型入手大样本地分析不同基因型HP(Ⅰ、Ⅱ)感染与其所致疾病(特别是胃癌)的相关性，并通过检测HP感染患者的细胞免疫应衩Th1/Th2，Treg)，寻找HP感染导致机体从浅表性胃炎～慢性萎缩性胃炎～肠化～异型增生～癌变的变化过程中，Th1/Th2的变化规律及其与HP基因型和Treg细胞的关系，并主要探讨机体的细胞免疫应答与胃癌发生的关系。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 幽门螺旋杆菌（HP）感染病人的筛选
• 1.实验材料
• 2.主要仪器
• 3.主要试剂
• 4.实验步骤
• 4.1 胃黏膜尿素酶试验
• 14C-尿素呼气试验'>4.2¹⁴C-尿素呼气试验
• 4.3 免疫印迹检测HP的分型
• 5.实验结果及讨论
• 5.1 病理学实验结果
• 5.2 HP感染的诊断实验结果
• 第二章 流式细胞术检测Ⅰ型HP感染及HP阴性受检者外周血单个核细胞IFN-γ,IL-4的表达及Treg细胞
• 1.流式细胞术简介
• 2.检测原理
• 3.实验材料
• 4.主要仪器
• 5.主要试剂
• 6.实验步骤
• 6.1 外周血单个核细胞刺激效果的的验证
• 6.2 Th1／Th2检测
• 6.3 Treg细胞的检测
• 7.实验结果及讨论
• 7.1 外周血单个核细胞刺激效果的的验证结果
• 7.2 流式细胞术检测Ⅰ型HP感染者Th1、Th2的表达以及Th1／Th2在胃部各疾病组间的变化
• 7.3 Treg细胞在Ⅰ型HP感染者和HP阴性受检者外周血中的表达
• 第三章 ELISA方法检测Ⅰ型HP感染者和HP阴性受检者血浆中IFN-γ、IL-4等细胞因子含量的检测
• 1.实验材料
• 2.主要仪器
• 3.主要试剂
• 4.实验步骤
• 4.1 IFN-γ ELISA
• 4.2 IL-4 ELISA
• 4.3 IL-2 ELISA
• 4.4 IL-6 ELISA
• 4.5 IL-10 ELISA
• 4.6 IL-12 ELISA
• 5.实验结果及讨论
• 第四章 荧光定量RT-PCR检测镜检标本及外周血单个核细胞IFN-γ及IL-4 mRNA的表达
• 1.荧光定量PCR技术简介
• 2.实验材料
• 3.主要仪器
• 4.主要试剂
• 5.实验步骤
• 5.1 细胞的刺激培养
• 5.2 RNA的提取
• 5.3 逆转录
• 5.4 荧光定量RT-PCR
• 5.5 琼脂糖电泳验证荧光定量RT-PCR产物的分子量大小
• 6.实验结果及讨论
• 第五章 免疫组化技术检测Ⅰ型HP感染者和无HP感染者镜检标本中IFN-γ和IL-4的表达
• 1.免疫组化技术的简介
• 2.主要材料
• 3.主要仪器
• 4.主要试剂
• 5.实验步骤
• 6.实验结果及讨论
• 6.1 Ⅰ型HP感染组IFN-γ及IL-4的表达
• 6.2 无HP感染组IFN-γ及IL-4的表达
• 全文小结
• 参考文献
• 博士学习期间发表论文的情况
• 致谢
• 综述及参考文献
• 附录
• 论文独创性声明
• 论文使用授权声明