凝溶胶蛋白在口腔鳞癌中的表达及作用

论文摘要

研究背景:口腔鳞癌是口腔颌面部最常见的上皮性恶性肿瘤之一,在人类恶性肿瘤中其发病率居前列,严重威胁患者的生命和影响其生存质量。口腔鳞癌的临床特点就是易侵袭和转移。侵袭和转移是癌的重要生物学特性之一,这一过程是临床治疗癌症失败和患者死亡的最直接、最主要的原因。肿瘤的侵袭与转移可能是通过上皮间质转化（EMT）机制实现的,作为重要的肌动蛋白结合蛋白之一,gelsolin通过对肌动蛋白的聚合/解聚作用,对细胞运动性及细胞骨架重构产生调节,从而影响EMT的进程而调节细胞的侵袭转移。通过研究gelsolin在人类口腔黏膜上皮组织中的分布情况及其与临床病理学参数之间的关系,以及对口腔鳞癌细胞的运动性及EMT的影响,明确gelsolin在口腔鳞癌侵袭转移中扮演的角色,结果有助于进一步明确其在侵袭转移调控中的生物学作用。材料与方法:1.采用免疫组织化学方法检测gelsolin在10例正常口腔黏膜、36例口腔白斑以及119例口腔鳞癌组织的石蜡切片标本中的表达情况;采用qPCR技术分析口腔鳞癌细胞株与永生化口腔上皮细胞的gelsolin的mRNA水平的表达差异,27例新鲜口腔鳞癌标本中癌组织与癌旁组织gelsolin的mRNA表达差异,并分析检测结果与临床病理学参数之间的相关性。2.采用RNA干扰与基因过表达技术对口腔鳞癌细胞株HSC-3的gelsolin基因表达进行调节,观察gelsolin对口腔鳞癌细胞迁移运动的影响。3.通过外源性EMT的诱导剂TGF-βl处理HSC-3细胞,诱导其EMT的发生,并研究gelsolin在这一过程中的作用,同时也研究了在gelsolin的基因表达改变后,HSC-3细胞的上皮标志物与间质标志物的变化。结果:1.在石蜡组织切片中,口腔鳞癌中gelsolin的表达显著低于正常口腔黏膜与口腔白斑;而在正常口腔黏膜与口腔白斑之间gelsolin的表达量无明显差异。2.在年龄大于70岁老年患者中gelsolin阴性表达率显著低于年轻组的患者,一旦出现肿瘤侵犯临近其它解剖部位则gelsolin阴性表达率显著升高,而临床晚期肿瘤患者gelsolin阴性表达率显著高于早期患者,颈部区域淋巴结转移患者gelsolin阴性表达率显著高于无区域淋巴结转移的患者。Gelsolin的表达率在不同性别之间以及组织病理学分级之间无统计学差异。3.新鲜组织标本癌灶中gelsolin的mRNA表达量低于癌旁组织中的表达量;头颈肿瘤细胞株中的gelsolin的表达量低于正常口腔上皮细胞株的表达量。4.Gelsolin低表达减少HSC-3细胞划痕实验的愈合时间,促进Transwell小室细胞迁移;而过表达增加HSC-3细胞划痕实验愈合时间,抑制Transwell小室细胞迁移。5.HSC-3细胞在TGF-β1诱导下发生EMT,在此过程中伴随着gelsolin蛋白表达下降;当采用RNA干扰技术降低HSC-3细胞的gelsolin蛋白表达时,该细胞上皮标志物表达下降、间质标志物表达上升,发生EMT。结论:1.在口腔鳞癌的发生过程中,口腔鳞癌组织中gelsolin的表达低于正常口腔黏膜组织与口腔癌前病变组织,表明gelsolin可能起到抑制口腔鳞癌发生的作用。2.口腔鳞癌瘤灶体积越大则gelsolin的表达量越低,临床晚期患者的gelsolin表达量低于早期患者,颈部区域淋巴结转移患者的gelsolin表达量低于无转移的患者,表明gelsolin低表达可能促进口腔鳞癌的进展过程。3.Gelsolin下调表达诱导口腔鳞癌细胞发生EMT而促进细胞的侵袭转移,可能是gelsolin低表达促进口腔鳞癌进展的原因之一。

论文目录

• 前言
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 绪论
• 第一部分 Gelsolin在口腔鳞癌中的表达及临床意义
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 第二部分 Gelsolin对口腔鳞癌细胞株迁移能力的影响
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 第三部分 Gelsolin在口腔鳞癌细胞株上皮间质转化中的作用
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 全文结论
• 参考文献
• 发表文章目录
• 致谢