论文摘要
第一部分 5-氮杂胞苷在骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞中诱导机制的研究 作为心脏组织工程学中的种子细胞,干细胞已成为心肌细胞移植的主要对象。由于伦理问题、免疫排斥反应等使胚胎干细胞移植的发展受到制约;成熟组织来源的干细胞即成体干细胞的研究及应用可避免上述问题。 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells MSCs)存在于骨髓基质中,传统认为它参与构成造血干细胞的生存和分化环境,对其起到支持作用,近年来发现MSCs具有向骨骼肌细胞、心肌细胞、内皮细胞、神经细胞、胶质细胞、肝细胞、脂肪细胞、骨及软骨等细胞分化的特性即所谓的“横向分化”的能力。MSCs可在体外进行原代和传代培养而仍保持其分化潜能。 大量研究证实MSCs在5—AzaC体外诱导下可定向分化为心肌样细胞,并表达心肌特异性蛋白标志:横纹肌肌动蛋白和连接蛋白43(Connexin-43)。然而,对其诱导机制的探讨,国内外少有报道。 本实验目的:(1)了解人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stemcells hMSCs)的生物学特性;(2)探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-AzaC)在hMSCs分化为心肌样细胞中的可能作用机制。 材料和方法: 1.hMSCs的分离、培养和表面标志测定: 从心肌梗死或心肌病患者髂骨处抽取骨髓液10mL,用Ficoll-淋巴细胞分离
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