论文摘要
目的本文旨在研究共同培养细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cell,CIK）和抗原呈递功能最强的树突状细胞（dendritic cell,DC）形成树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（dendritic cells-induced killer cells ,DC-CIK）在抗白血病中的免疫效应机制。通过DC-CIK体外抗肿瘤免疫效应机制的研究,为过继免疫治疗血液肿瘤提供部分实验依据。方法1、用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血,获得单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMNC）,然后分别诱导生成DC和CIK,共培养成DC-CIK细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态;用苔盼蓝方法进行细胞计数并测绘生长曲线（growth curve ,GC）;应用流式细胞仪检测DC和CIK的细胞表面抗原表达情况。2、以K562细胞为靶细胞,分为PBMNC组,DC组,CIK组和DC-CIK组四组,以其相应的细胞为效应细胞,采用MTT法进行体外杀伤实验。3、应用ELISA法分别检测PBMNC组,DC组,CIK组和DC-CIK组细胞培养基上清中IL-17的分泌量。结果1、分离PBMNC后,成功培养出纯度高、活性好的DC和CIK细胞,并应用流式细胞仪检测到细胞表面高表达特异性免疫抗原。2、随着效靶比的增加,各组效应细胞对K562细胞的杀伤活性也增加;同一效靶比下,各组效应细胞对K562细胞的杀伤活性不同,其中DC-CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性最强（P<0.05）。3、PBMNC组,DC组,CIK组和DC-CIK组IL-17的分泌量分别为（4.15±0.77）ng/L,（4.56±0.39）ng/L, （4.95±0.51） ng/L和（8.36±0.39）ng/L。DC-CIK细胞组中IL-17的分泌量明显高于其他三组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1、DC-CIK细胞抗白血病的作用显著,较单纯应用DC细胞或CIK细胞有更强的抗肿瘤活性。2、DC-CIK细胞抗白血病的细胞毒性与分泌大量细胞因子的免疫效应有关。
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