论文摘要
背景与目的 因听毛细胞缺失和(或)与螺旋神经元的变性导致的感音神经性聋是健康的一大障碍。过去人们一直认为在哺乳动物耳蜗中的上述改变是不可逆的;目前,国内外许多关于神经干细胞内耳移植的实验研究表明神经干细胞可用于进行损伤听毛细胞和(或)螺旋神经元的修复。Malgrange等在胚胎后期及新生大鼠耳蜗中发现了巢素蛋白阳性细胞(巢素质白是NSC的标志分子);Mao等将神经干细胞移注入内耳的第14天,发现其在前庭阶、鼓阶、螺旋神经节和血管纹处均有广泛分布;Ito等实验表明在神经干细胞内耳移植后的第4周,部分移植细胞已表现出内、外毛细胞的形态特征;Iguchi等报道,神经干细胞在耳蜗外淋巴间隙至少能存活28天,并可表达脑源性神经生长因子(BDNF)。这种神经生长因子不仅可以有效地促进神经干细胞的存活与分化,保护听毛细胞和螺旋神经元免受毒性因子的损伤,而且可以提高螺旋神经元的敏感性。神经干细胞进入内耳的途径是决定治疗成败的一个主要因素。要将这项技术应用于临床,必须找到一种既能保存原有听力,又不破坏耳蜗结构的移植途径。目前用于外源物质内耳移植的主要有以下几个途径:①经圆窗膜注入鼓阶外淋巴径路;②经耳蜗底转开窗注入鼓阶外淋巴径路;③经颅后窝注入内淋巴囊径路;④经半规管开窗径路;⑤经脑脊液径路。上述径路中以圆窗膜和耳蜗底转开窗两种经路最为常用。本实验经圆窗膜和耳蜗底转两种主要途径行神经干细胞内耳移植,评价移植手术操作是否造成听力损失和毛细胞损伤。神经干细胞内耳移植后第7天,通过不同组间底转、倒数第二转和顶转鼓阶内存活神经干细胞数目的比较,确定哪一种途径神经干细胞的转染效率更高。通过神经干细胞内耳移植后第7天与未移植神经干细胞组底转鼓阶内BDNF表达情况的比较,来评价神经干细胞分泌神经营养因子的情况。
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