投喂云芝多糖对银鲫免疫机能和生理生化特性的影响

论文摘要

本研究以银鲫（Carassius auratus）为试验对象，在饲料中分别添加不同浓度的云芝多糖（Coriolus versciclor polysaccharides，CVP），研究云芝多糖对银鲫非特异性免疫机能、免疫应答能力及血液生理生化特性的影响。主要研究结果如下：1．在研究云芝多糖对银鲫非特异性免疫机能影响的试验中，云芝多糖在饲料中的添加量分别为：0g／kg（C0组）、0．25g／kg(C0．25组)、0．5g／kg(C0．5组)、1．0g／kg(C1．0组)、2．0g／kg(C2．0组)和4．0g／kg(C4．0组)。各组分别投喂相应的饲料，于试验开始前（第0d）和试验开始后第7d、14d、21d、28d、35d、42d和56d取样检测供试鱼血液的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活力、血清SOD活性和补体C3、C4的含量。结果显示：饲料中添加0．25g／kg的云芝多糖，对银鲫的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活力、血清SOD酶活性和补体C3、C4的含量影响不显著（P>0．05）；添加0．5g／kg和1．0g／kg的云芝多糖，对供试鱼上述指标都有一定程度的提高，并当添加量为1．0g／kg时，在14d～21d内效果最显著（P<0．05）；而添加2．0g／kg和4．0g／kg的云芝多糖，上述指标在试验的后期均显著低于对照组。本研究结果说明在银鲫饲料中添加0．5g／kg～1．0g／kg的云芝多糖对银鲫的非特异性免疫机能有增强作用。2．在研究云芝多糖对银鲫免疫应答能力影响的试验中，Ⅰ0组、Ⅰ0．5组、Ⅰ1.0组和Ⅰ2．0组注射灭活的嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）疫苗作为免疫组，C0组、C0．5组、C1．0组和C2．0组注射无菌生理盐水作为对照组。其中Ⅰ0．5组与C0．5组饲料中云芝多糖添加量为0．5g／kg，Ⅰ1．0组与C1．0组饲料中云芝多糖添加量为1．0g／kg，Ⅰ2．0组与C2．0组饲料中云芝多糖添加量为2．0g／kg，Ⅰ0组与C0组投喂基础饲料。各组分别投喂相应的饲料，于免疫前（第0d）和免疫后第7d、14d、21d、28d和35d测定银鲫的血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性、补体C3、C4含量、凝集抗体效价、RBC-C3b受体花环率、RBC-IC花环率和攻毒后的免疫保护率。结果显示：（1）饲料中添加0．5g／kg和1．0g／kg的云芝多糖可显著提高受免银鲫的血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性及补体C3、C4含量（P<0．05）；而饲料中添加2．0g／kg的云芝多糖在试验的后期对银鲫的上述指标起抑制作用。（2）与对受免银鲫血液白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活性及补体C3、C4含量的影响相似，云芝多糖也能提高非受免组银鲫的上述指标，影响趋势基本一致；但与受免组银鲫相比，非受免组银鲫的上述指标均低于相应的免疫组。（3）饲料中添加0．5g／kg和1．0g／kg的云芝多糖在第21d和28d能显著提高银鲫的RBC-C3b受体花环率和降低RBC-IC花环率；而饲料中添加2．0g／kg的云芝多糖在试验后期会降低银鲫RBC-C3b受体花环率和提高RBC-IC花环率，但与对照组差异不显著（P>0．05）。（4）云芝多糖能提高银鲫的凝集抗体效价。其中，当云芝多糖浓度为1．0g／kg，投喂时间为21d时，受免银鲫的平均凝集抗体效价最高，为597．3。（5）投喂云芝多糖能提高银鲫经嗜水气单胞菌活菌攻毒后的存活率。其中，当云芝多糖在饲料中的添加浓度为1．0g／kg时，受免银鲫的存活率和免疫保护率最高，分别为85％和57．14。3．在研究云芝多糖对银鲫血液生理生化特性影响的试验中，云芝多糖在饲料中的添加量分别为：0g／kg（C0组）、0．25g／kg(C0．25组)、0．5g／kg(C0．5组)、1．0g／kg(C1．0组)、2．0g／kg(C2．0组)和4．0g／kg(C4．0组)。各组分别投喂相应的饲料，于试验开始前（第0d）和试验开始后第14d、28d、42d和56d取样检测供试鱼血液的红细胞数、白细胞数、血红蛋白含量和红细胞沉降率等生理指标，以及血清血糖、胆固醇、甘油三酯、白蛋白、总蛋白、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶等生化指标。结果显示：投喂0．25g／kg的云芝多糖对银鲫的血液各个指标无显著影响（P>0．05），对机体的生理状态影响较小。持续投喂0．5g／kg～1．0g／kg的云芝多糖，短期内（14d或28d）可使银鲫血细胞数量和血红蛋白含量升高，红细胞沉降率下降；长时间投喂（42d或56d），可使银鲫血清血糖、尿素、胆固醇和甘油三酯含量及谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性降低，血清总蛋白和白蛋白含量及血清碱性磷酸酶活性升高；表明0．5g／kg～1．0g／kg的云芝多糖在一定程度上可改善银鲫的生理机能，提高机体的代谢强度。长时间持续投喂2．0g／kg～4．0g／kg的云芝多糖，银鲫血细胞数量、血红蛋白、血清总蛋白、白蛋白含量和碱性磷酸酶活性下降，血液红细胞沉降率、血清血糖、尿素氮、胆固醇和甘油三酯含量及谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性升高，表明机体氧运输能力减弱，消化排泄功能减退。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 综述:真菌多糖研究概况
• 1.1 真菌多糖的的种类和特性
• 1.1.1 香菇多糖
• 1.1.2 银耳多糖
• 1.1.3 云芝多糖
• 1.1.4 灵芝多糖
• 1.1.5 茯苓多糖
• 1.1.6 裂褶菌多糖
• 1.1.7 灰树花多糖
• 1.1.8 冬虫夏草多糖
• 1.1.9 其他真菌多糖
• 1.2 真菌多糖在水产中的应用概况
• 1.2.1 真菌多糖对水产动物免疫功能的调节作用
• 1.2.2 真菌多糖对水产动物的促生长作用
• 1.2.3 真菌多糖的抗菌、抗病毒作用
• 1.2.4 真菌多糖的抗应激作用
• 1.3 影响真菌多糖免疫作用的因素
• 1.3.1 分子量和化学结构的影响
• 1.3.2 给药剂量的影响
• 1.3.3 持续给药时间的影响
• 1.3.4 给药方式的影响
• 1.3.5 真菌多糖的免疫协同作用
• 1.4 云芝多糖的研究概况
• 1.4.1 云芝多糖的免疫增强作用
• 1.4.2 云芝多糖的抗肿瘤作用
• 1.4.3 云芝多糖的保肝、抗溃疡作用
• 1.4.4 云芝多糖的抗氧化作用
• 1.4.5 云芝多糖的抗病毒作用
• 1.4.6 云芝多糖的降血脂、血糖作用
• 1.5 本研究的的目的与意义
• 第二章 云芝多糖对银鲫非特异性免疫功能的影响
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 供试鱼分组及其饲养
• 2.1.2 试验饲料的制备
• 2.1.3 吞噬原的制备
• 2.1.4 采血
• 2.1.5 血液白细胞吞噬活性的测定
• 2.1.6 血清溶菌酶的测定
• 2.1.7 血清补体（C3、C4）含量的测定
• 2.1.8 血清超氧化物歧化酶（SOD）测定
• 2.1.9 数据处理
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 云芝多糖对银鲫血液白细胞吞噬活性的影响
• 2.2.2 云芝多糖对银鲫血清溶菌酶活性的影响
• 2.2.3 云芝多糖对银鲫血清补体（C3、C4）含量的影响
• 2.2.4 云芝多糖对银鲫血清超氧化物歧化酶的影响
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 云芝多糖对银鲫免疫应答能力的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 供试鱼分组及饲养
• 3.1.2 试验饲料的制备
• 3.1.3 供试菌株的培养及菌苗的制备
• 3.1.4 吞噬原的制备
• 3.1.5 样品的采集
• 3.1.6 血液中白细胞吞噬活性的测定
• 3.1.7 血液中红细胞免疫活性的测定
• 3.1.8 血清中溶菌酶活性的测定
• 3.1.9 血清中补体（C3、C4）含量的测定
• 3.1.10 血清中凝集抗体效价的测定
• 3.1.11 攻毒
• 3.1.12 数据处理
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 云芝多糖对受免银鲫血液白细胞吞噬活性的影响
• 3.2.2 云芝多糖对受免银鲫红细胞免疫活性的影响
• 3.2.3 云芝多糖对受免银鲫血清溶菌酶活性的影响
• 3.2.4 云芝多糖对受免银鲫血清补体（C3、C4）含量的影响
• 3.2.5 云芝多糖对银鲫血清凝集抗体效价的影响
• 3.2.6 云芝多糖对银鲫存活率和免疫保护率的影响
• 3.3 讨论
• 3.3.1 云芝多糖对银鲫免疫应答能力的影响
• 3.3.2 云芝多糖对受免银鲫红细胞免疫功能的影响
• 3.3.3 免疫多糖促进动物免疫机能机理的探讨
• 3.4 小结
• 第四章 云芝多糖对银鲫血液生理生化特性的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验鱼的分组及饲养
• 4.1.2 试验饲料的制备
• 4.1.3 样品的采集与分析
• 4.1.4 数据处理
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 云芝多糖对银鲫血液生理特性的影响
• 4.2.2 云芝多糖对银鲫血液生化特性的影响
• 4.3 讨论
• 4.3.1 云芝多糖对银鲫血液生理特性的影响
• 4.3.2 云芝多糖对银鲫血液生化特性的影响
• 4.4 小结
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表的论文