ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖分化与凋亡的影响

论文摘要

体脂过度沉积能够降低胴体的瘦肉率,进而影响肉质品质。体脂沉积是前体脂肪细胞增殖和分化的结果,前体脂肪细胞凋亡也影响体脂沉积。因此,研究前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的调控机理能够为控制体脂沉积提供理论基础,为家畜育种和动物生产提供参考。本实验以生长发育正常、健康状况良好的20 日龄雄性SD 大鼠为实验动物,以前体脂肪细胞培养为基础研究了不同浓度ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖、分化与凋亡的影响。利用MTT 比色分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响。结果表明,高浓度(10-4、10-5和10-7 mol/L)的ATRA 抑制大鼠前体脂肪细胞的增殖（P<0.01）,抑制效果随ATRA浓度的升高而增强;低浓度(10-7和10-8 mol/L)的ATRA 促进大鼠前体脂肪细胞的增殖（P<0.01）,促进效果随ATRA 浓度的升高而减弱。通过测定前体脂肪细胞中AgNORs 平均面积的变化,分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞增殖活性的影响。结果显示,前体脂肪细胞硝酸银染色后,AgNORs 呈黑色或棕褐色小颗粒,位于核仁和细胞核内,细胞核呈淡黄色,细胞质不着色。在整个培养过程中,前体脂肪细胞的增殖活力先降低,而后升高,最后降到最低点。高浓度(10-4、10-5和10-6 mol/L)ATRA 处理组前体脂肪细胞的增殖活性小于对照组,而低浓度(10-7和10-8 mol/L)ATRA处理组前体脂肪细胞的增殖活性大于对照组。利用油红O 染色提取法检测了ATRA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。结果表明, 10-4、10-5和10-6 mol/L ATRA抑制前体脂肪细胞的分化（P<0.01）,抑制效果随ATRA浓度的升高而增强;10-7和10-8 mol/L ATRA促进前体脂肪细胞的分化（P<0.01）,促进效果随ATRA 浓度的升高而减弱。利用吖啶橙荧光染色和免疫组化SP 法分析了ATRA 对大鼠前体脂肪细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2 表达的影响,结果表明5×10-5和10-5 mol/L ATRA 促进促凋亡基因Bax的表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2 的表达,诱导大鼠前体脂肪细胞凋亡。ATRA 的浓度不同,对大鼠前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的影响也不同,进一步研究不同浓度ATRA调控大鼠前体脂肪细胞增殖、分化和凋亡的机理,能够为控制体脂沉积提供理论基础。

论文目录

• 文献综述
• 第一章 脂肪细胞分化的研究
• 1 脂肪细胞的起源
• 2 前体脂肪细胞分化的过程
• 2.1 前体脂肪细胞分化的主要过程
• 2.2 生长抑制和细胞周期调节对前体脂肪细胞分化的影响
• 3 前体脂肪细胞分化过程中基因表达的变化
• 3.1 前体脂肪细胞分化早期基因表达的变化
• 3.2 前体脂肪细胞分化晚期基因表达的变化
• 4 影响前体脂肪细胞分化的因素
• 5 前体脂肪细胞分化过程中的主要转录因子和信号分子
• 5.1 PPAR家族
• 5.2 C/EBP家族
• 5.3 ADD1/SREBP-1c
• 6 前体脂肪细胞分化的调控网络
• 第二章 脂肪细胞凋亡的研究
• 1 细胞凋亡的特征
• 2 BCL-2家族在细胞凋亡中的作用
• 3 前体脂肪细胞和脂肪细胞凋亡的研究进展
• 3.1 局部作用因子对前体脂肪细胞和脂肪细胞凋亡的影响
• 3.2 中枢作用因子对前体脂肪细胞和脂肪细胞凋亡的影响
• 第三章 ATRA调控前体脂肪细胞分化和凋亡的研究进展
• 1 ATRA的作用机理
• 2 ATRA对前体脂肪细胞分化的影响
• 2.1 不同浓度ATRA对前体脂肪细胞分化的影响
• 2.2 ATRA处理时间对前体脂肪细胞分化的影响
• 2.4 ATRA对ES细胞向脂肪细胞分化的影响
• 3 ATRA对前体脂肪细胞凋亡的影响
• 试验研究
• 前言
• 第四章 ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 MTT比色结果
• 2.2 AgNORs平均面积检测结果
• 3 讨论
• 3.1 不同浓度ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖效果的影响
• 3.2 不同浓度ATRA对大鼠前体脂肪细胞增殖活性的影响
• 第五章 ATRA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 前体脂肪细胞分化的形态学观察
• 2.2 油红O染色提取法检测结果
• 3 讨论
• 3.1 高浓度的ATRA抑制前体脂肪细胞分化
• 3.2 低浓度的ATRA促进前体脂肪细胞分化
• 第六章 ATRA对大鼠前体脂肪细胞凋亡的影响
• 1 实验材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 前体脂肪细胞凋亡的形态学观察
• 2.2 Bax和Bcl-2的表达变化
• 3 讨论
• 3.1 荧光染色检测细胞凋亡的分析
• 3.2 ATRA对Bax和Bcl-2表达的影响
• 3.3 前体脂肪细胞和脂肪细胞凋亡过程中Bax和Bcl-2的表达变化
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介