卵黄抗体抑制胃内幽门螺杆菌致病作用的研究

论文摘要

目前世界上感染幽门螺杆菌的人越来越多,传统的抗生素疗法由于耐药株的增多限制了它的治疗效果,寻找高效、低毒、廉价的抗幽门螺杆菌（ Helicobacter pylori, H.pylori）的防治方法已经迫在眉捷。本试验以幽门螺杆菌NCTC11637为材料,采用不同培养基对H.pylori进行培养,以研究不同培养基对H.pylori生长的影响。结果表明:（1）采用固体培养H.pylori时,在微需氧条件下,培养基分别为哥伦比亚琼脂+混合抗生素+6%脱纤维山羊血,哥伦比亚琼脂+混合抗生素+6%兔血清, 37℃培养4d,均可培养出H.pylori;在严格无菌的条件下,不添加混合抗生素,培养基为哥伦比亚琼脂+6%兔血清,对细菌的生长没有影响,且不会造成杂菌污染。（2）采用液体培养H.pylori时,培养基为布氏肉汤基础加混合抗生素和6%山羊血清, H.pylori增菌迅速。菌株采取冷冻保存液法保存于- 70℃- 80℃低温条件下,可以成功复苏。利用蒙古沙土鼠（MG）建立H.pylori NCTC11637株胃内感染模型。感染方法有两种,一种方法是MG禁食18h后用50%酒精0.5ml预处理,6h后接种H.pylori,间隔12、24h分别再次接种。另一种方法的接种方法与前述的方法相同,但接种后每日口服雷尼替丁5mg/kg体重。胃内接种H.pylori后,于第7d、15 d、35 d、45 d分别用幽门螺杆菌抗原酶联免疫法诊断试剂盒、细菌培养和胃组织切片的方法检测胃内是否已感染,观察MG胃内细菌感染情况和胃病理组织学变化。结果表明,胃内灌服酒精损伤胃粘膜与每日口服雷尼替丁相结合,在人工感染35 d后,胃内有大量H.pylori感染定植,胃组织固有层有大量炎性细胞浸润和肠化生现象。利用蒙古沙土鼠作为实验动物,观察H.pylori特异卵黄抗体对胃内H.pylori感染的治疗效果。实验鼠间隔48h两次口服接种H.pylori（NCTC11637）布氏培养液1ml（1.15×108CFU）,首次接种7 d后将实验鼠随机分为四组（15只/组）,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌服生理盐水、复合抗菌素和抗H.pylori卵黄抗体,1次/天,连续12 d;Ⅳ组间隔48h皮下注射抗H.pylori卵黄抗体两次。在用药前实验鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率100%;用药后第14 d,Ⅱ组鼠的H.pylori清除率为60%;Ⅲ组、Ⅳ组鼠胃内均有少量H.pylori存在。用药25 d后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的胃内H.pylori清除率分别为80%、60%、60%。灌服和注射抗H.pylori卵黄抗体,可以抑制沙土鼠胃内H.pylori感染,其抑制效果与抗菌素相似。在成功研制出抗H.pylori卵黄抗体的基础上,利用蒙古沙土鼠作为实验动物,观察抗H.pylori卵黄抗体对H.pylori感染的防制作用。实验鼠分为四组（36只/组）,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌服生理盐水、复合抗菌素和抗H.pylori卵黄抗体,连续14 d。Ⅳ组皮下注射抗H.pylori卵黄抗体,1次/天,每间隔48h后注射1次,连续预防两周。在首次用药后第8d口服接种幽门螺杆菌（NCTC11637）2.75×108CFU（布氏培养液）,连续口服4 d。在接种后第23、30、45 d,Ⅰ组鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率100%;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的感染率低于44%。灌服和注射抗H.pylori卵黄抗体,可以抑制沙土鼠感染H.pylori,其抑制效果与抗菌素组无明显差异（p>0.05）。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 文献综述
• 一 幽门螺杆菌动物模型的研究进展
• 1 选择应用对策及展望
• 2 不同实验动物模型及优缺点
• 3 存在的问题
• 参考文献
• 二 幽门螺杆菌感染的研究进展
• 1 病因
• 2 诊断
• 3 治疗
• 4 预防
• 参考文献
• 试验研究
• 试验一 幽门螺杆菌的培养与保存
• 1 材料与方法
• 2 试验结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 试验二 幽门螺杆菌感染实验
• 1 材料和方法
• 2 结果与分析
• 3 讨论
• 参考文献
• 试验三 卵黄抗体对沙土鼠胃内感染幽门螺杆菌的治疗试验
• 1 材料与方法
• 2 试验结果
• 3 讨论与结论
• 参考文献
• 试验四 卵黄抗体对幽门螺杆菌感染沙土鼠的预防试验
• 1 材料与方法
• 2 试验结果
• 3 讨论与结论
• 参考文献
• 结论
• 附录
• 攻读硕士期间发表的论文
• 致谢