油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性研究

论文摘要

油菜菌核病（Sclerotinia sclerotiorum （Lib.） de Bary）是我国油菜上的重要真菌病害之一,严重影响了油菜生产。本文用多菌灵对四川、青海、湖南、甘肃、江苏、安徽6个地区的油菜菌核病菌进行抗性检测,对病菌抗性机制和抗性菌株防治药剂进行筛选研究。主要结论如下：1.油菜菌核病菌对多菌灵的抗性检测采用最低抑制浓度法（MIC）,测定四川、青海、湖南、甘肃等地区油菜菌核病菌对多菌灵敏感性,结果表明在含1000μg/mL多菌灵PDA平板上不能正常生长,有晕圈或微弱菌丝生长的菌株所占比例（总测定菌株数）分别为51.24%（404株）、51.88%（374株）、29.36%（109株）、73.43%（143株）,江苏和安徽地区有晕圈的比例分别为50%（88株）、41.05%（436株）。采用EC50法对各个地区菌株进行毒力测定,结果表明：在不同地区EC50值分布范围有差异,其中四川、青海、湖南、甘肃4个省未检出高抗菌株,EC50值在0.02-0.41μg/mL之间,在江苏和安徽两省检测到抗性菌株（EC50>1000μg/mL）的频率分别为35.71%和18.18%。2.对多菌灵高抗油菜菌核病菌菌株特性与抗性机制抗药菌株与敏感菌株在油菜叶片上的致病力、产草酸能力和对温度敏感性方面没有显著差异性。分析发现抗性菌株与敏感菌株编码β-微管蛋白第198位氨基酸的碱基由GAG突变为GCG,导致对多菌灵高抗。3.对多菌灵抗性油菜菌核病菌防治药剂筛选通过单剂混配,发现嘧菌酯与异菌脲以1：1的比例混配时共毒系数最高,达272。三唑酮与菌核净二者以10.8：0.12和8.4：0.63混配时的共毒系数分别为146和143,表现增效作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1 油菜菌核病菌简介
• 1.1 致病菌-核盘菌
• 1.2 发病时期与症状
• 1.3 侵染循环
• 1.4 发病因素
• 1.5 综合防治
• 2 油菜菌核病菌对苯并咪唑类杀菌剂的抗性研究进展
• 2.1 苯并咪唑类杀菌剂
• 2.2 苯并咪唑类杀菌剂的作用机制与抗性机制
• 2.3 苯并咪唑类杀菌剂的抗性现状
• 2.4 防治抗药性菌株的药剂研究
• 3 本论文研究的目的与意义
• 第二章 油菜菌核病菌对多菌灵的抗性检测
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 MIC测定结果
• 2.2 毒力测定结果
• 3 讨论
• 第三章 多菌灵高抗油菜菌核病菌菌株特性与抗性机制
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 主要仪器与设备
• 1.3 多菌灵抗性、敏感菌株致病性验证比较
• 1.4 多菌灵抗性、敏感菌株产草酸能力测定
• 1.5 多菌灵抗性、敏感菌株对温度敏感性测定
• 1.6 病菌DNA的提取
• 1.7 病菌β-微管蛋白基因聚合酶链式反应（PCR）
• 1.8 序列分析与突变位点比较
• 2 结果与分析
• 2.1 多菌灵抗性、敏感菌株致病性验证比较
• 2.2 多菌灵抗性、敏感菌株产草酸能力测定结果
• 2.3 多菌灵抗性、敏感菌株对温度敏感性测定结果
• 2.4 病菌β-微管蛋白基因PCR扩增产物及序列测定
• 2.5 油菜菌核病菌β-微管蛋白基因片段突变比较
• 3 讨论
• 第四章 多菌灵抗性油菜菌核病菌防治药剂筛选
• 1 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 供试药剂
• 1.3 供试培养基
• 1.4 主要仪器和设备
• 1.5 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 单剂毒力测定
• 2.2 最佳配比筛选
• 2.3 复配的联合毒力测定
• 2.4 交互抗药性测定
• 3 讨论
• 参考文献
• 致谢