本文主要研究内容
作者林金德,杨雪琴,魏韬,郭丽琼,林俊芳,陈韵声,黄诗诗（2019）在《金针菇G蛋白偶联受体基因的CRISPR/Cas9基因组编辑载体构建及转化研究》一文中研究指出：通过氨基酸同源比对(Blast P)以及金针菇冷诱导前后菌丝阶段和原基阶段的转录组数据分析,获得了金针菇中的两个假定G蛋白偶联受体基因Fvgpcr1、Fvgpcr2。对获得的金针菇假定G蛋白偶联受体基因Fvgpcr1、 Fvgpcr2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)的pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr1-sgRNA1/sgRNA2、pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr2-sgRNA1/sgRNA2等4个表达载体。通过农杆菌介导(ATMT)将表达载体pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr-sgRNA转化金针菇菌丝体,采用潮霉素和头孢毒素低浓度初筛和高浓度复筛,经两段筛选获得金针菇拟转化子。经对拟转化子进行PCR鉴定、RT-qPCR检测和Western杂交验证,结果显示表达载体pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr-sgRNA成功整合进金针菇基因组中,FvCas9蛋白正常表达,但未得到Fvgpcr基因敲除突变体。本研究利用农杆菌介导转化法在金针菇中构建了CRISPR/Cas9敲除体系,对后续目标基因的敲除有着重要意义。
Abstract
tong guo an ji suan tong yuan bi dui (Blast P)yi ji jin zhen gu leng you dao qian hou jun si jie duan he yuan ji jie duan de zhuai lu zu shu ju fen xi ,huo de le jin zhen gu zhong de liang ge jia ding Gdan bai ou lian shou ti ji yin Fvgpcr1、Fvgpcr2。dui huo de de jin zhen gu jia ding Gdan bai ou lian shou ti ji yin Fvgpcr1、 Fvgpcr2gou jian le ji yin zu bian ji (CRISPR/Cas9)de pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr1-sgRNA1/sgRNA2、pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr2-sgRNA1/sgRNA2deng 4ge biao da zai ti 。tong guo nong gan jun jie dao (ATMT)jiang biao da zai ti pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr-sgRNAzhuai hua jin zhen gu jun si ti ,cai yong chao mei su he tou bao du su di nong du chu shai he gao nong du fu shai ,jing liang duan shai shua huo de jin zhen gu ni zhuai hua zi 。jing dui ni zhuai hua zi jin hang PCRjian ding 、RT-qPCRjian ce he Westernza jiao yan zheng ,jie guo xian shi biao da zai ti pCAMBIA0390-hph-Fvcas9-Fvgpcr-sgRNAcheng gong zheng ge jin jin zhen gu ji yin zu zhong ,FvCas9dan bai zheng chang biao da ,dan wei de dao Fvgpcrji yin qiao chu tu bian ti 。ben yan jiu li yong nong gan jun jie dao zhuai hua fa zai jin zhen gu zhong gou jian le CRISPR/Cas9qiao chu ti ji ,dui hou xu mu biao ji yin de qiao chu you zhao chong yao yi yi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自菌物学报的林金德,杨雪琴,魏韬,郭丽琼,林俊芳,陈韵声,黄诗诗，发表于刊物菌物学报2019年03期论文，是一篇关于金针菇论文,蛋白偶联受体论文,农杆菌介导转化论文,菌物学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自菌物学报2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：金针菇论文; 蛋白偶联受体论文; 农杆菌介导转化论文; 菌物学报2019年03期论文;