论文摘要
目的肿瘤坏死因子相关诱导调亡配体（tumor necrosis factor-relatedapoptosis-inducing ligand,TRAIL）可通过与受体的特异性结合而诱导肿瘤细胞凋亡,而对机体正常组织无毒副作用。但不同种类的肿瘤细胞对TRAIL的敏感性不同,现有研究表明,人喉癌Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感。磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinases,PI3K）是一类特异的催化磷脂酰肌醇脂物质的激酶,PI3K信号通路的激活可在抑制细胞凋亡、加速细胞周期、促肿瘤细胞转移等方面对肿瘤产生影响。根据二者的反应机制,PI3K通路可能对TRAIL诱导Hep-2细胞调亡的作用有一定的影响。本文拟通过加入PI3K通路的特异性抑制剂LY294002,探讨PI3K通路在Hep-2细胞中对TRAIL的促调亡作用可能产生的影响及其相关机制。方法（1）以20μmol/L LY294002、500ng/ml及200ng/ml的TRAIL、20μmol/LLY294002+500ng/ml TRAIL、20μmol/L LY294002+200ng/ml TRAIL分别作用于Hep-2细胞24h后,在相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率;（2）以20μmol/L LY294002、200ng/ml TRAIL、20μmol/L LY294002+200ng/ml TRAIL分别作用于Hep-2细胞12h、48h后,流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率;（3）20μmol/L LY294002作用于Hep-2细胞24h后,流式细胞术检测Hep-2细胞表面TRAIL受体的表达。结果（1）经LY294002+TRAIL处理的细胞凋亡率高于单独用TRAIL处理的细胞;（2）Hep-2细胞的DcR1、DcR2表达高于DR4、DR5的表达;加入LY294002作用后,DR4、DR5的表达上升,DcR1、DcR2的表达下降。结论（1）Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感,而LY294002可使Hep-2细胞对TRAIL的敏感性增加;（2）Hep-2细胞对TRAIL的诱骗受体DcR1、DcR2的表达高于其死亡受体DR4、DR5的表达,可能是Hep-2细胞对TRAIL诱导凋亡抵抗的主要原因;（3）经LY294002作用24h后,Hep-2细胞的TRAIL死亡受体明显增加,而诱骗受体下降,可能是Hep-2细胞对TRAIL敏感性增加的原因之一。