田华王娟通讯作者
（曲靖市马龙区人民医院检验科；云南曲靖655100）
摘要目的分析痰涂片结合痰培养在临床的价值。方法选择本院2017年9月-2018年10月期间住院且留痰送检进行致病菌培养、鉴定及药敏的患者共计560例，将送检痰样本采取痰培养，痰涂片结合痰培养两种检测方法。比较两种检测方法的检测结果。结果痰培养组检出致病菌率为46.43%，而痰涂片结合痰培养检出致病菌率为70.89%，痰涂片结合痰培养的致病菌检出率显著高于痰培养（P＜0.05）。结论痰涂片结合痰培养具有更高的致病菌检出率，为临床医生提供有效可靠的诊疗数据，值得推广。
关键词：痰涂片；痰培养；季也蒙假丝酵母菌；肺炎克雷伯菌
急慢性下呼吸道感染、社区和医院获得性感染是各科室患者常见的呼吸道感染疾病。临床中采用标本病原菌微生物检测对患者疾病的确诊有着重要意义，但是痰样本送检的阳性率较低，这导致医生对呼吸道疾病患者特别是有耐药性患者束手无策。且痰样本的留取质量与致病菌培养准确性有直接关系，也是样本高质量保证的重要环节。如果在取痰样本时不严谨，送样护士告知不清晰，延误送检时间等都会造成样本检测结果不合格率的增加，降低检出率。本文结合痰涂片镜检与痰培养检测出来的结果进行分析，评估痰样本质量，提升细菌培养质量控制，为本院简历参考标准。
1资料与方法
1.1一般资料选择本院2017年9月-2018年10月期间住院且留痰送检进行致病菌培养、鉴定及药敏的患者共计560例，其中男480例，女80例，各占比85.71%和14.29%，年龄（19-96）岁；痰标本来源：其中有454例（81.07%）痰标本来自于呼吸内科，95例（16.96%）来自于综合内科，ICU及外科共计11例（1.96%）。
1.2检测仪器及试剂
鉴定药敏仪：BD-phoenix100，血培养仪：BD9120，二氧化碳培养箱：上海力申科学仪器公司HF90，电热恒温箱：DHP-420，恒温培养箱：GSP-927MBE立式灭菌器：LMQ.C，生物安全柜：AIRTECH/BHC-1300ⅡA/B3型，自动染色机：DL-DYEGR，血平板：郑州安图生物工程股份有限公司，染色液：珠海贝索生物技术有限公司，药敏鉴定卡：碧迪医疗器械（上海）有限公司，接种培养液：碧迪医疗器械（上海）有限公司
1.3方法
痰涂片镜检方法：清晨待患者漱口洁癖，指导患者自气管用力咳出咽部深处第一口痰，并利用一次性干燥、清洁、不吸水、不渗漏、无菌的广口带盖痰杯留存，盖上杯盖，立即送检。首先观察痰样本的颜色（红、黄、绿、白等），性状（浓样、唾液样、水样、泡沫性、粘液样、血性等）。痰样本涂片须在生物安全柜内打开风机进行。用接种环将带血或是脓性挑取出来制成均匀薄片，做革兰染色，用低倍镜观察白细胞和上皮细胞的分布情况，将结果详细记录。痰培养：做涂片的同时挑取相同性质痰样本接种在康凯平板、巧克力平板、血琼脂平板，再将康凯平板的痰样本放入普通细菌培养箱，巧克力平板、血琼脂平板的痰样本让负含有体积分数为5%CO2细菌培养箱，培养温度为35℃，培养时间18-48小时。
按照全国临床检验操作规程[1]将痰涂片进行分类：合格痰涂片指镜下见白细胞≥25/HP，上皮细胞≤10/LP或≥10/LP；痰涂片不合格是指镜下可见白细胞≤25/HP，上皮细胞≤10/LP或≥10/LP，白细胞的确认使用油镜辅助。不合格的痰样本退回与临床沟通后重新留取。
1.4统计学处理用SPSS17.0统计学分析软件进行统计分析和处理。当计量资料为正态分布时用±s描述，并采用t检验；计数资料采用x2检验。P≤0.05为两组间差异有统计学意义。
2结果
痰涂片结合痰培养与痰培养结果比较同一个痰样本分作两组，一组做痰涂片与痰培养相结合，一组仅做痰培养，其结果显示痰涂片结合痰培养的检出致病菌率高达70.89%，痰培养致病菌检出率仅46.43%，还有漏检，两组的致病菌检出率差异具有统计学意义（P＜0.05）。见下表。
3讨论
痰培养是下呼吸道感染病原诊断的常规方法，明确致病菌有利于医生的临床诊断以及治疗，而合格的痰样本是检查的关键。痰样本的涂片染色镜检可经镜检结果来检验痰样本是否合格，而痰样本质量的保证是痰培养和痰涂片镜检结果准确性的基本前提，只有合格的痰样本在检测时才能得出准确的结果数据[2]。痰样本的采样原本因采用下呼吸道气管下采集法，由于采集过程又创伤痛苦且操作麻烦，大部分患者无法接受，因此现在多采用自然咳痰法，咳嗽口咽部有大量正常菌群，患者咳痰时会造成污染[3]，造成痰样本不合格。然而造成不合格痰样本原因有很多，还有是因为护士未详细对患者进行痰留样的细节讲述，其对痰留样意识低，认为只要是从口中吐出即可，并未咳出深部的痰，其次是患者在咳痰时未能彻底清洁漱口造成谈污染，再有采集时间不合理，未能再痰留样后2小时内送检，没有按照要求保存或是时间过长等都会导致病菌数发生异常；而检验过程中人为因素也会导致微生物检验样本质量不合格，影响医生对患者疾病的判断，影响患者治疗效果[4]。如果是因为咳痰不规范或是痰液不合格的情况，因及时与患者沟通重新留取，直至得到合格的样本。
本文对同一痰样本分成两组，一组利用痰涂片镜检和痰培养两组检验结果结合得出结论，一组仅用痰培养得出结论，并对两组结果进行了比较，结果显示：痰培养组检出致病菌率为46.43%，而痰涂片结合痰培养检出致病菌率为70.89%，痰涂片结合痰培养的致病菌检出率显著高于痰培养（P＜0.05）。单一的痰培养还存在漏检的情况，致病菌漏检率高达7.32%，严重影响医生对疾病的诊断以及治疗的效果。在试验中，痰涂片和痰培养的结果并非一致，这也许与痰样本的性状有关，而且当痰过粘稠时，病菌被包裹，着色不易，与背景色相似以致漏检等，同时患者的真正致病菌可能是季也蒙假丝酵母菌，痰培养出肺炎克雷伯菌却为定植菌。痰涂片镜检中则大量出现季也蒙假丝酵母菌，却未在痰培养中出现，血培养帮助痰涂片镜检时确诊其中的酵母即为致病菌，临床医生使用抗真菌治疗，其治疗效果显著，由此可见痰涂片的重要[5]。
由此可见，痰涂片结合痰培养具有更高的致病菌检出率，为临床医生提供有效可靠的诊疗数据，值得推广。
参考文献
[1]叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程.３版.南京：东南大学出版社，2006：15鄄20.
[2]姚蓓，张丽丽.重庆某二甲医院痰涂片结果与培养结果的分析[J].国际检验医学杂志，2017,1（1）：116-118.
[3]汪林娇，易薇，赵曙刚.痰标本涂片镜检与细菌培养结果符合性的分析[J].中国医药科学，2016,10（19）：139-141.
[4]王志超，杜豪伟，栗朋辉.有效提高临床微生物检验质量的针对性对策[J].临床医药文献电子杂志，2015,23（5）：4800-4801
[5]贺雯.痰培养与痰培养+痰涂片结果比较谈痰涂片的重要性[J]。临床医学工程，2016，03：40-41,47.