广西野生杨梅资源调查及遗传多样性研究

论文摘要

杨梅是中国的特产果树,在中国境内资源丰富、分布广。广西地理环境比较特殊,具有丰富的野生杨梅资源。广西野生杨梅资源种类多,品种划分长期模糊不清。为摸清广西境内的野生杨梅种类、资源分布和居群遗传结构等,本论文开展了广西野生杨梅资源调查,利用分子标记进行分类,并对其野生居群的遗传结构进行了探讨,所获主要结果如下:1、利用形态鉴定对75份野生杨梅资源进行了研究,发现广西野生杨梅资源丰富。主要以红种或粉红种为主,果实成熟期早,供应期长,并从中选择出6个大果、味佳的优良单株。2、利用ISSR标记对40份广西杨梅资源进行了研究,将其分成四大类,即杨梅、青杨梅、大叶青杨梅、毛杨梅。杨梅种按地理环境不同可分成两亚类。此外,对大叶青杨梅作为青杨梅的一个变型提出了质疑。3、利用cpSSR标记对40份广西杨梅资源进行了研究,广西杨梅资源分布以B、D、E三类不同单倍型为主,而H、I型为大叶青杨梅所特有,J型为毛杨梅所特有。聚类分析将样品划分成五大类,可将大叶青杨梅、毛杨梅分类区别,而青杨梅与杨梅则难以区别开来,结果与ISSR分析具有较大的差异。再次对大叶青杨梅作为青杨梅的一个变型提出了质疑,推测青杨梅与杨梅可能具有共租现象,荸荠杨梅与毛杨梅关系比较近,遗传变异来源可能相同。4、利用ISSR标记对10个广西野生杨梅居群进行了遗传多样性和遗传结构的研究,发现广西杨梅的遗传多样性比较丰富。遗传变异主要来源于种群内,居群间变异来源比较小。利用Nei’s遗传距离进行聚类分析,广西野生杨梅资源按地理环境分成两大类。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 概述
• 1.2 杨梅地理分布
• 1.3 杨梅分类研究进展
• 1.3.1 园艺学分类
• 1.3.1.1 杨梅品种分类
• 1.3.1.2 矮杨梅品种的分类
• 1.3.2 生物技术辅助分类
• 1.3.2.1 同工酶谱水平
• 1.3.2.2 分子水平
• 1.3.3 广西杨梅研究概况
• 1.4 植物遗传多样性研究进展
• 1.4.1 遗传多样性的概念及意义
• 1.4.2 分子标记的遗传多样性研究
• 1.4.2.1 品种鉴定
• 1.4.2.2 亲缘关系
• 1.4.2.3 居群遗传结构
• 1.5 本研究的立论依据
• 2 材料与方法
• 2.1 野生杨梅资源调查与开发利用
• 2.1.1 供试材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 杨梅核基因组ISSR研究
• 2.2.1 试验器材
• 2.2.1.1 供试材料
• 2.2.1.2 实验仪器
• 2.2.1.3 实验试剂
• 2.2.2 试验方法
• 2.2.2.1 基因组DNA的提取
• 2.2.2.2 初始PCR反应程序的建立
• 2.2.2.3 初始PCR反应体系
• 2.2.2.4 ISSR-PCR反应条件优化
• 2.2.2.5 ISSR反应引物筛选
• 2.2.2.6 产物检测
• 2.2.2.7 数据的统计分析
• 2.3 杨梅叶绿体基因组SSR研究
• 2.3.1 试验器材
• 2.3.1.1 材料收集
• 2.3.1.2 实验仪器
• 2.3.1.3 实验试剂
• 2.3.2 试验方法
• 2.3.2.1 基因组DNA的提取及其检测
• 2.3.2.2 cpSSR反应程序的建立
• 2.3.2.3 cpSSR-PCR反应条件的优化
• 2.3.2.4 cpSSR引物筛选
• 2.3.2.5 产物检测
• 2.3.2.6 数据分析
• 2.4 杨梅居群遗传多样性ISSR分析
• 2.4.1 试验材料
• 2.4.2 试验方法
• 2.4.2.1 数据的统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 杨梅种质资源调查与开发利用
• 3.1.1 成熟期
• 3.1.2 果实色泽
• 3.1.3 果实大小
• 3.1.4 果实品质
• 3.1.5 果核脆硬与大小
• 3.1.6 优良株系的初选
• 3.2 杨梅核基因组ISSR研究
• 3.2.1 DNA的提取及质量检测
• 3.2.2 反应程序的确定
• 3.2.3 反应体系的优化
• 3.2.3.1 DNA模板浓度的影响
• 3.2.3.2 引物浓度的影响
• 3.2.3.3 rTaq DNA聚合酶的影响
• 3.2.3.4 dNTP浓度的影响
• 3.2.3.5 最佳反应体系的确定
• 3.2.4 ISSR反应引物筛选
• 3.2.5 ISSR扩增结果
• 3.2.6 聚类分析
• 3.3 杨梅叶绿体基因组SSR研究
• 3.3.1 DNA的提取及质量检测
• 3.3.2 cpSSR-PCR反应程序的建立
• 3.3.3 反应体系的优化
• 3.3.3.1 DNA模板浓度的影响
• 3.3.3.2 引物浓度的影响
• 3.3.3.3 rTaq DNA聚合酶的影响
• 3.3.3.4 dNTP浓度的影响
• 3.3.3.5 cpSSR反应体系的确定
• 3.3.4 cpSSR反应引物筛选
• 3.3.5 cpSSR遗传多样性分析
• 3.3.6 聚类分析
• 3.4 杨梅居群遗传多样性ISSR分析
• 3.4.1 引物筛选
• 3.4.2 ISSR-PCR扩增结果分析
• 3.4.3 群体及物种水平的多样性分析
• 3.4.4 聚类分析
• 4 讨论与结论
• 4.1 野生杨梅资源调查与开发利用
• 4.2 杨梅核基因组ISSR研究
• 4.3 杨梅叶绿体基因组SSR研究
• 4.4 野生杨梅居群遗传多样性ISSR分析
• 4.4.1 居群的遗传多样性
• 4.4.2 遗传分化对居群结构的影响
• 4.5 两种不同分子标记的比较
• 4.6 问题与展望
• 4.6.1 建立禁伐保护区和迁地保护
• 4.6.2 重视优良单株的选择和繁育引种
• 4.6.3 加大资金投入，实现规模化经营
• 4.6.4 推广先进栽培技术，提高杨梅品质
• 4.6.5 加强杨梅保鲜和产品深加工的研究与推广
• 4.6.6 加大杨梅作为生态经济树种和药用植物的推广与开发力度
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间科研、论文发表等情况