C-反应蛋白重要结构元件在其胞内折叠、组装中的作用

论文摘要

C-反应蛋白（C-reactive protein, CRP）是一种人类急性期血浆蛋白,属于环状五聚体蛋白家族。CRP在先天免疫中扮演重要角色,且与多种慢性炎症疾病的病生理过程相关。在五聚体CRP蛋白配体结合面和效应面分别具有Ca2+离子结合位点、PC结合位点和Clq结合位点等重要结构元件；单体间相互作用预测其具有4对离子键,疏水作用也是亚基问相互作用的主要形式；在每个亚基内36位和97位半胱氨酸间形成二硫键,在蛋白功能转换和结构稳定性维持方面具有重要作用。在实验中,我们利用相关氨基酸定点突变,研究这些重要结构元件在CRP的胞内折叠、组装过程中的作用。结果显示,Ca2+离子结合是蛋白结构稳定和五聚体构象维持的重要因素,同样单体间形成的离子键也是五聚体形式所必需的。有意思的是,通过在亚基组装界面上引入亚基间二硫键,我们表达出了一种具有特殊结构特征的CRP。这些发现有助于对CRP胞内折叠、组装机制的深入理解。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 CRP蛋白
• 1.2 CRP蛋白的结构
• 1.2.1 PC结合位点结构
• 2+离子结合位点结构'>1.2.2 Ca²⁺离子结合位点结构
• 1.2.3 Clq结合位点结构
• 1.3 CRP结构的稳定性
• 1.3.1 CRP蛋白稳定性维持
• 1.3.2 pCRP、mCRP构象变换
• 1.4 CRP受体
• 1.5 CRP与炎症反应
• 1.6 CRP与心血管疾病
• 1.6.1 pCRP、mCRP构象变化与存在争议
• 1.6.2 hsCRP与心血管疾病
• 1.6.3 CPR与LDL
• 1.6.4 CRP与pH值
• 1.7 CRP与补体途径
• 1.8 CRP合成
• 1.9 蛋白质折叠
• 第二章 材料和实验方法
• 2.1 蛋白
• 2.2 抗性检测
• 2.3 插入蛋白基因序列载体信息
• 2.4 细胞系
• 2.5 转染
• 2.6 分子实验
• 2.7 免疫印迹
• 2.8 蛋白质亚基间相互作用软件分析
• 第三章 实验结果
• 3.1 免疫抗性检测结果
• 3.2 WESTERN检测结果
• 3.3 荧光定量结果
• 第四章 讨论
• 参考文献
• 在学期间的研究成果
• 致谢