论文摘要
研究背景放射治疗是肺癌、乳腺癌、食管癌、纵隔肿瘤等胸部肿瘤的主要治疗方法之一,在控制恶性肿瘤进展方面发挥着重要作用。然而,胸部肿瘤的放疗照射野常常不可避免地包及食管,从而出现放射性食管炎,临床出现的症状有胸骨后烧灼感、吞咽困难伴吞咽疼痛。轻者病人摄入不足,重者导致病人营养不良、电解质紊乱,甚至中断治疗。放射治疗所造成的食管损伤呈剂量依赖性增加,并且限制了放疗的进程,可以持续到治疗结束后一段时间。因此,防治放射性食管炎对减轻症状,保证放射治疗按计划如期完成,提高肿瘤控制率有重要意义。目前临床一般采用预防性抗生素、糖皮质激素、补液、支持等对症处理,虽然在某种程度上可减轻患者的痛苦,但不能降低该病发生率,且存在药物毒副作用。一些中药已被证明具有抗辐射损伤作用,但通过动物实验来证明中药的抗辐射损伤作用还鲜见报道。蛋珍油（Danzhen Oil）是防治放射性食管炎的临床经验方,本实验通过对家兔食管放射性损伤急性期病理组织学的观察,采用Western-bloting和RT-PCR技术分别检测IL-8和TGF-β1蛋白质及mRNA表达水平,以及用实时荧光定量PCR法检测COX-2和MMP-2 mRNA的表达改变。以临床常用的西药（思密达）作为阳性对照,观察蛋珍油的辐射防治作用,为进一步指导蛋珍油对急性放射性食管损伤防治的临床应用提供实验和理论依据。目的本实验以15Gy的X射线经家兔前胸野单次照射食管中平面,复制成人类食管放射性损伤急性期动物模型,评价临床中药经验方蛋珍油（Danzhen Oil）对放射性食管炎的防治作用,为其临床应用提供实验和理论依据。方法24只雄性家兔按随机抽签法分为单纯照射（R）组、蛋珍油给药（D）组、思密达给药（S）组和正常对照（C）组,每组6只。R组、D组、S组接受照射,家兔清醒状态下,采用SIEMENS M2数字型医用电子直线加速器,经前胸野单次照射食管中平面,照射剂量为15Gy,源皮距（SSD）为100cm,照射面积是7cm×3cm,照射剂量率是200cGy/min。蛋珍油给药量是:7ml/次,思密达给药量是:3g/次。每天分3次经口腔缓慢给药,连续给药5天后立即统一处死家兔。取材切片,行苏木精-伊红（HE）染色,在光镜下观察食管组织病理学改变,采用Western-bloting和RT-PCR技术分别检测IL-8和TGF-β1蛋白质及mRNA表达水平,并用实时荧光定量PCR法检测COX-2和MMP-2 mRNA的表达。结果1、D组家兔食管组织于照射后第5天放射食管损伤比R组明显减轻。光镜下R组家兔食管组织切片可见上皮有脱落,粘膜固有层及粘膜下层出现水肿,粘膜下层毛细血管扩张、充血明显,并有大量炎性细胞浸润,炎性细胞以中性粒细胞为主,周围区域有散在的嗜酸性粒细胞存在。D组亦可见粘膜上皮连续;棘细胞层、基底细胞层细胞增生;粘膜下层血管扩张,但炎性细胞浸润少见;而且粘膜层较R组明显增厚。2、Western-bloting结果显示:D组中IL-8和TGF-β1蛋白相对含量（0.589±0.053,0.511±0.022）,较R组中IL-8和TGF-β1蛋白相对含量（0.744±0.026,0.686±0.091）明显减少（P<0.01）,与S组中IL-8和TGF-β1蛋白相对含量（0.547±0.062,0.496±0.066）相比,差异无统计学意义（P>0.05）。RT-PCR结果显示:R组中IL-8和TGF-β1 mRNA相对含量（0.697±0.076,0.626±0.071）与D组（0.149±0.056,0.162±0.022）、S组（0.332±0.081,0.396±0.018）、C组中IL-8和TGF-β1 mRNA相对含量（0.126±0.092,0.108±0.058）相比,差异均有统计学意义（P<0.01）,D组中IL-8和TGF-β1 mRNA相对含量低于S组（P<0.05）。3、实时荧光定量PCR结果显示:R组中COX-2和MMP-2 mRNA含量（3.794±0.083,2.714±0.500）明显高于C组中COX-2和MMP-2 mRNA含量（2.935±0.181,1.913±0.194）（P<0.05）,与D组中COX-2和MMP-2 mRNA含量（3.094±0.079,2.017±0.065）相比有显著差异（P<0.05）。D组中COX-2和MMP-2 mRNA含量与C组差异无统计学意义（P>0.05）。结论成功复制了人类放射性食管损伤急性期动物模型,发现蛋珍油能明显减轻辐射所引起食管急性损伤的病理改变,抑制食管急性放射性损伤中IL-8和TGF-β1蛋白表达及mRNA表达;抑制放射性食管损伤中COX-2和MMP-2 mRNA表达,对家兔急性放射性食管炎具有防治作用。
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