论文摘要
目的:从诱导机体内源性氧化于抗氧化保护系统的角度,初步探讨血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响。方法:硫代乙酰胺（TAA）诱导肝硬化模型时间共计10周。40只健康雄性Wistar大鼠,体重（300±20）g（由山西医科大学生理教研室提供）。随机分为5组:正常+LPS（对照组）、肝硬化+生理盐水对照组（TAA组）、肝硬化+LPS组（TAA+LPS组）、肝硬化+LPS+AG（AG组）、肝硬化+LPS+hemin组（HM组）。除对照组外,其余各组自由饮加有硫代乙酰胺（TAA）的水,0.03%的TAA水诱导饲喂5周时间,再改为0.04%的TAA水诱导饲喂5周。于模型造成后,除TAA组外其余各组向腹腔内注入LPS3mg/kg,TAA组给等容量的生理盐水;HM组于注射LPS前12小时,腹腔注射HM（40 mg/kg）;AG组于注射LPS 3 h后,腹腔注射AG（50 mg/kg）。并在注入LPS6小时后,7%水合氯醛5ml-kg,腹腔注射麻醉,各组动物经腹主动脉穿刺采全血。取血后,迅速取出肝脏,冲净余血,将肝组织组织迅速投入4%的多聚甲醛中浸泡固定24小时,做石蜡切片以备用。采用常规生化法测血浆中天门冬氨基酸转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）;硫代巴比妥酸法（TBA）测血浆中MDA含量;用硝酸还原酶法测血浆NO浓度,按试剂盒说明操作。用免疫组织化学SABC法检测肝组织HO-1,iNOS表达和分布,并用BI-2000型计算机图象分析软件对HO-1和iNOS表达进行半定量分析。结果:（1）HO-1的蛋白表达:方差分析表明:对照组、TAA、AG组、TAA+LPS、HM组各组大鼠的灰阶值显著依次降低,且有明显得差别（P＜0.05）;（2）iNOS的蛋白表达:对照组、TAA组、AG组、TAA+LPS组、HM组的iNOS灰阶值可以看出:各组肝组织中iNOS灰的表达依次降低,且有明显得差别（P＜0.05）。（3）对照组、TAA组、AG组、TAA+LPS组、HM组的血浆中的NO、ALT/AST依次升高,且各组之间有明显得差别（P＜0.05）;对照组、TAA+LPS组、HM组的血浆中的MDA依次升高,且各组之间有明显得差别（P＜0.05）;TAA与AG组血浆中的MDA变化不明显,之间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:HO-1的高表对实验性的肝硬化内毒素血症有损伤作用,其机制可能诱导iNOS/NO,从而使ONOO-这种氧化物的过量生成有关。应用iNOS的选择性的抑制剂AG后对肝脏有保护作用,其机制可能与抑制iNOS/NO从而减少ONOO-的过量生成有关。
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标签：血红素加氧酶论文; 氯化高铁血红素论文; 诱导型一氧化氮合酶论文; 氨基胍论文; 肝硬化内毒素血症论文;