论文摘要
NMDA受体是一种离子型谷氨酸受体,在许多神经系统的生理功能和病理机制中起着至关重要的作用,如突触可塑性、突触发生、疼痛和兴奋性神经毒性等。前人的研究发现,经典的NMDA受体是异四聚体复合物,由两个NR1和两个NR2亚单位组成。大多NR1或NR2亚单位在细胞中单独表达时都会被滞留在ER中,不能被运送到细胞膜表面。这主要是因为这些NR亚单位内含有ER滞留序列,只有完成异聚体装配,这些ER滞留序列才能被掩蔽或抵消掉。所以,NMDA受体亚单位在ER内正确装配是其发挥后续生理功能的前提。目前,NMDA受体亚单位装配的分子机制并不明确。为了讨论NMDAR受体亚单位装配的问题,我们将一种生物物理的方法---荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer, FRET）应用到我们的研究中。FERT技术可以实时观察活细胞内的蛋白之间的相互作用并且被广泛应用于多种受体装配,构象改变等研究中。为了研究NMDA受体装配的关键区域,我们构建了一系列NR亚单位嵌合体或缺失体,并且在其末端融合了CFP或YFP荧光蛋白,用FRET技术检测这些突变亚单位装配。我们发现,一方面,整个N末端对于受体亚单位的装配不是必需的；另一方面,NR1亚单位的跨膜区对于其同聚体装配或者与NR2的异聚体装配都是关键的,且可以介导NR1同聚体或NR1/NR2异聚体的相互作用。
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