副干酪乳杆菌素的分离纯化及其在肉制品中的应用初探

论文摘要

本课题组从L-乳酸酸菜发酵液中分离出一株乳酸杆菌,通过对该菌株的优化与鉴定,确定其为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）,命名为副干酪乳杆菌HD1.7。经过前期研究得知,副干酪乳杆菌HD1.7所产抑菌物质（副干酪乳杆菌素）具有抗菌活性强,抑菌范围广等优点,具有良好的应用前景。本试验对副干酪乳杆菌素进行了分离纯化、初步确定其相对分子量并对其在肉制品中的应用做了初步研究,为日后该种细菌素的大量生产及其在食品中的广泛应用奠定一定的理论基础。本试验对副干酪乳杆菌素的分离纯化方法及条件进行了研究,确定了以30%～60%硫酸铵逐级盐析、截留相对分子量5,000和10,000的两种超滤膜进行超滤、SP-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-50凝胶层析的操作流程对副干酪乳杆菌素进行分离纯化。同时,在分离纯化过程中进行效价和蛋白含量的测定。经分离纯化后的副干酪乳杆菌素,比活力为1725.3AU/mg,是原发酵液37.09倍,得率为10.46%。通过尿素-SDS-PAGE对副干酪乳杆菌素的相对分子量进行了测定,初步确定其相对分子量为7,800。对副干酪乳杆菌素在蒸煮火腿和烟熏肉中的防腐应用做了初步的研究。结果表明副干酪乳杆菌素与某些化学防腐剂单独使用时均有一定的防腐作用。但如果将副干酪乳杆菌素与化学防腐剂联合使用其防腐的效果更佳、且能减少化学防腐剂的添加量,从而减小化学防腐剂对人体的副作用。试验结果表明,副干酪乳杆菌素粗制品添加量为100mg/kg与1%乳酸钠联合使用的防腐效果要优于其它防腐联合剂的组合。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 天然食品防腐剂的研究现状
• 1.2 乳酸菌细菌素概述
• 1.2.1 乳酸菌细菌素的发现及其开发利用现状
• 1.2.2 乳酸菌细菌素的种类
• 1.2.3 乳酸菌细菌素活性的检测
• 1.3 乳酸菌细菌素分离纯化方法
• 1.3.1 乳酸菌细菌素分离纯化的常用方法
• 1.3.2 乳酸菌细菌素分离纯化的研究进展
• 1.4 乳酸菌细菌素的应用进展
• 1.4.1 乳酸菌细菌素的抑菌活性
• 1.4.2 乳酸菌细菌素的安全性
• 1.4.3 食品防腐技术研究进展
• 1.4.4 化学防腐剂在肉制品防腐中的应用
• 1.4.5 微生物防腐剂Nisin
• 1.5 课题研究的目的与意义
• 第2章 副干酪乳杆菌素的蛋白含量测定及初步分离
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 菌株
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 试剂与仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 副干酪乳杆菌素活性的检测
• 2.2.2 蛋白含量的测定
• 2.2.3 副干酪乳杆菌素的初步分离
• 2.3 试验结果
• 2.3.1 效价标准曲线的绘制
• 2.3.2 蛋白含量标准曲线的绘制
• 2.3.3 硫酸铵盐析法粗提副干酪乳杆菌素
• 2.3.4 超滤分离副干酪乳杆菌素
• 2.3.5 本部分纯化效果
• 2.4 小结与讨论
• 2.4.1 副干酪乳杆菌素活性检测方法
• 2.4.2 副干酪乳杆菌素效价的测定
• 2.4.3 蛋白含量的测定
• 2.4.4 超滤
• 第3章 副干酪乳杆菌素的纯化
• 3.1 试验材料
• 3.1.1 菌株与培养基
• 3.1.2 试剂与仪器
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 SP-Sepharose Fast Flow 纯化副干酪乳杆菌素的研究
• 3.2.2 Sephadex G-50 纯化副干酪乳杆菌素的研究
• 3.2.3 副干酪乳杆菌素分子量的测定（尿素-SDS-PAGE）
• 3.3 试验结果
• 3.3.1 SP-Sepharose Fast Flow 离子交换层析
• 3.3.2 Sephadex G-50 凝胶层析
• 3.3.3 分离纯化效果
• 3.3.4 副干酪乳杆菌素相对分子量的测定（尿素-SDS-PAGE）
• 3.4 小结与讨论
• 第4章 副干酪乳杆菌素在肉制品中的应用初探
• 4.1 试验材料
• 4.1.1 原料
• 4.1.2 辅料及主要试剂
• 4.1.3 主要设备
• 4.1.4 培养基
• 4.2 副干酪乳杆菌素在蒸煮火腿防腐中的应用
• 4.2.1 试验方法
• 4.2.2 各项指标的测定
• 4.2.3 结果与分析
• 4.2.4 讨论
• 4.3 副干酪乳杆菌素在烟熏肉防腐中的应用
• 4.3.1 试验方法
• 4.3.2 各项指标的测定
• 4.3.3 结果与分析
• 4.3.4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢