阿司匹林抵抗的危险因素调查及临床防治的实验研究

论文摘要

目的评价老年心血管病患者阿司匹林抵抗的潜在危险因素；观察在糖尿病、自发性高血压大鼠模型中阿司匹林联合辛伐他汀或雷米普利对血小板功能的影响。方法临床研究共入选454例老年心血管病患者,平均年龄（73.91±8.12岁）,口服阿司匹林（≥75 mg）1个月以上,以光比浊法血小板聚集试验（light transmission aggregometry, LTA）和血栓弹力图法（thrombelastography platelet mapping assay, TEG）检测血小板聚集功能；流式细胞仪检测血小板活化指标CD62P、PAC-1水平。阿司匹林抵抗的定义：LTA法：二磷酸腺苷（adenosine diphosphate, ADP）诱导的血小板聚集率≥70%和花生四烯酸（arachidonic acid, AA）诱导的血小板聚集率≥20%定义为阿司匹林抵抗；阿司匹林半抵抗：ADP诱导的血小板聚集率≥70%或AA诱导的血小板聚集率≥20%。TEG法：AA诱导的血小板聚集率≥50%定义为阿司匹林抵抗。实验研究在STZ诱导糖尿病大鼠、自发性高血压大鼠、Wistar及Wistar Kyoto大鼠（对照组）中分别给予阿司匹林、辛伐他汀、雷米普利、阿司匹林联合辛伐他汀或雷米普利等药物（灌胃8周）。采用全血阻抗法和TEG法评价血小板聚集功能,流式细胞仪检测血小板活化指标CD62P水平。Elisa法检测大鼠血清或血浆一氧化氮（nitric oxide, NO）、内皮素（endothelin,ET）、前列环素（prostacyclin,PGI2）、脂联素（adiponectin, APN）、血栓素B2 （Thromboxane B2, TXB2）水平；生化法检测大鼠血清超氧化物歧化酶（super oxide dismutase, SOD）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）水平；大鼠胸主动脉离体血管张力实验评价内皮功能；Western Blot法检测大鼠胸主动脉血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）.血红素氧合酶-2（heme oxygenase-2, HO-2）.内皮型NO合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS）、磷酸化-内皮型NO合酶（phosphorylated endothelial nitric oxide synthase, p-eNOS）、抗凋亡蛋白（Bcl-2）、环加氧酶-2（cyclooxygenases-2, COX-2）等蛋白的表达水平。结果临床研究通过LTA法检测,38例（8.4%）患者为阿司匹林抵抗,166例（36.6%）患者为阿司匹林半抵抗。经TEG法检测,111例（24.4%）患者为阿司匹林抵抗,其中LTA法检出33例。166例半抵抗患者中,TEG法检出40例患者为阿司匹林抵抗。Kappa分析显示,两种方法检测的一致性为0.364（95%CI,0.265～0.454）。Logistic多因素回归分析显示,空腹血糖（odds ratio （OR）=1.211,95% CI:1.047-1.402, p=0.010）、CD62P（OR=1.010,95% CI：1.002-1.019,p=0.019）,使用硝酸酯类药物（OR=0.638,95% CI：0.414-0.983,p=0.042）及血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素受体拮抗剂（angiotensin-converting enzyme inhibitors/angiotensin receptor blockers, ACEIs/ARBs）（OR=0.524,95% CI：0.309-0.890,p=0.017）与阿司匹林抵抗相关。LTA法检测分组,阿司匹林抵抗、半抵抗组发生不良心血管事件的患者为19例（9.3%）,阿司匹林敏感组发生不良心血管事件的患者为23例（9.2%）。TEG法检测分组,阿司匹林抵抗组发生不良心血管事件的患者为11例（9.9%）,阿司匹林敏感组发生不良心血管事件的患者为31例（9.0%）。实验研究与对照组大鼠相比,糖尿病大鼠、自发性高血压大鼠,其血小板活化及聚集值增高,且模型组呈现阿司匹林反应性减低现象p<0.05)；在糖尿病大鼠、自发性高血压大鼠模型中,阿司匹林联合辛伐他汀、雷米普利显著降低血小板活化及聚集值（p<0.05）,其通过上调HO-1、eNOS、p-eNOS、Bcl-2等蛋白的表达水平,同时升高血清APN水平,下调COX-2蛋白表达水平,最终通过改善内皮功能,均衡TXA2/PGI2比值、增加NO水平,从而发挥其协同抗血小板作用。结论临床研究提示老年心血管病患者阿司匹林抵抗发生率较高,空腹血糖、CD62P为阿司匹林抵抗的危险因素,使用ACEIs/ARBs及硝酸酯药物为其保护性因素。阿司匹林抵抗或半抵抗患者发生不良心血管事件的概率高于阿司匹林敏感者。实验研究提示：糖尿病大鼠、自发性高血压大鼠呈现阿司匹林反应性减低现象,辛伐他汀、雷米普利能够改善血小板对阿司匹林的反应性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 老年心血管病患者阿司匹林抵抗的相关危险因素调查
• 前言
• 对象和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分 阿司匹林联合辛伐他汀对糖尿病大鼠血小板功能的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第三部分 阿司匹林联合雷米普利对自发性高血压大鼠血小板功能的影响
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 附件
• 缩略语表
• 攻读学位期间发表文章情况
• 致谢