葡萄糖氧化酶基因的克隆及高效表达

葡萄糖氧化酶基因的克隆及高效表达

论文摘要

本文从一株产葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,简称GOD)的点青霉中克隆得到了葡萄糖氧化酶编码序列,构建了高效表达、有效分泌的葡萄糖氧化酶的重组毕赤酵母生物反应器,这为开发高效生产葡萄糖氧化酶的生物技术提供途径。序列分析表明,该葡萄糖氧化酶基因长1815bp,共编码604个氨基酸,前18个氨基酸为信号肽编码序列,氨基酸序列中共有4个潜在的糖基化位点。将克隆得到的葡萄糖氧化酶基因在大肠杆菌和毕赤酵母中进行表达,构建出GOD的高产酵母菌株。在酵母α-Factor及AOX1启动子和终止子(TT)的调控下,点青霉GOD在GS115中大量表达并分泌到胞外。在3L发酵罐水平检测条件下,甲醇诱导132小时,发酵液中的酶活达到111.3U/mL。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 葡萄糖氧化酶的来源
  • 1.2 葡萄糖氧化酶的应用
  • 1.3 葡萄糖氧化酶的测定方法
  • 1.4 巴斯德毕赤酵母表达系统
  • 1.5 本文研究的目的和意义
  • 第二章 葡萄糖氧化酶基因的克隆
  • 2.1 材料和方法
  • 2.2 实验结果
  • 2.3 讨论
  • 第三章 葡萄糖氧化酶基因的表达
  • 3.1 材料和方法
  • 3.2 实验结果
  • 致谢
  • 参考文献
  • 相关论文文献

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