论文摘要
目的:（1）通过改良高脂饲料快速建立大鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型;（2）观察维生素E和硒对大鼠非酒精性脂肪性肝病解偶联蛋白2（UCP2）及相关因子表达水平的影响。方法:采用7周龄SD大鼠,雄性,40只,根据完全随机分组原则进行分组,分为正常组、模型组、维生素E组、硒组、维生素E和硒合用组5组,每组均为8只。正常组喂养基础饲料,其余4组均给予改良高脂饲料喂养,同时,维生素E组给予维生素E 250mg/kg饲料,硒组给予亚硒酸钠0.5mg/kg饲料,维生素E和硒合用组同时给予维生素E250mg/kg饲料和亚硒酸钠0.5mg/kg饲料;5组大鼠均在同一喂养条件下喂养5周,5周处死全部大鼠,观察各组大鼠的一般情况和体重变化;HE染色法观察每组大鼠肝脏病理形态变化;苏丹IV染色观察了解模型组大鼠肝细胞胞浆内脂滴存在情况,检测各组大鼠血清中甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。免疫组织化学染色观察正常组、模型组、维生素E组、硒组、维生素E和硒合用组5组大鼠肝组织中UCP2、核因子-κB蛋白（NF-κB）表达情况,并采用RT-PCR技术检测5组大鼠肝组织中UCP2mRNA表达水平的变化。结果:（1）与正常组比,模型组大鼠体重变化无显著性差异,在光镜下见模型组大鼠肝细胞内弥漫性的肝细胞脂肪变性和水肿,肝小叶中见少量炎症细胞浸润,未见明显坏死灶及肝纤维化;苏丹Ⅳ染色证实肝细胞内存在大量脂滴;模型组大鼠血清TG、TC、ALT、MDA含量均高于正常组,分别为1.28±0.61（mmol/L）、12.78±1.47 （mmol/L）、91.1±11.16（U/L）、13.40±4.24（nmol/ml） （p均<0.05）;模型组大鼠血清SOD活力比正常组显著降低（p<0.05）;模型组大鼠肝组织中UCP2、NF-κB蛋白表达强度和UCP2mRNA表达水平均高于正常组（p<0.05）。（2）与模型组比,维生素E组大鼠肝细胞可见脂滴和细胞水肿;硒组大鼠肝细胞脂变可见少量脂滴和肝细胞水肿,硒和维生素E合用组大鼠的肝细胞脂肪变性和水肿程度有明显改善;模型组肝组织电镜观察发现线粒体数量增多伴肿胀。各干预组血清中TG、TC、MDA含量均低于模型组（P<0.05）;各干预组血清SOD活力均高于模型组（P<0.05）,尤以两者合用组为甚,表明硒和维生素E有协同作用。免疫组织化学染色显示各干预组肝组织中UCP2、NF-κB蛋白表达强度均弱于模型组（p<0.05）;RT-PCR结果显示:UCP2mRNA表达水平模型组最高,各干预组UCP2mRNA表达水平均有降低（p<0.05）,以两者合用组的下调作用最强。结论:（1）采用改良高脂饲料5周能成功建立非酒精性脂肪肝大鼠模型。（2）NAFLD时肝脏UCP2表达上调,可使能量储备降低,使肝细胞对坏死的敏感性增加,进一步促进NAFLD的发生发展。（3）对大鼠非酒精性脂肪肝病给予维生素E、硒或两者合用进行干预,均可以减轻肝脏脂肪变性和炎症病变的程度,从而达到延缓或阻止脂肪肝进展的目的,以两者合用效果最好。