论文摘要
海参是海洋中重要的食物和药物资源,含有海参多糖、海参皂苷、胶原蛋白等多种生物活性物质,具有提高机体免疫力、抗肿瘤、促进造血功能、抗凝血和降血脂等多种生理功效。不同种类的海参,由于其生活的海域、环境不同,其营养价值和功效亦存有差异。本文本研究测定了不同海域3种海参:美国肉参（Isostichopus badionotus）、墨西哥刺参（Isostichopus fuscus）和冰岛刺参（Cucumaria frondosa）的主要活性成分,并比较研究了其对小鼠免疫机能的调节作用;制备海参胶原蛋白多肽,采用血管内皮细胞损伤模型和神经细胞损伤模型,评价了海参胶原蛋白多肽的抗氧化活性,为系统评价不同种类海参的营养功效,进一步合理开发利用海参提供科学依据。主要研究结果如下:采用化学分析方法,分析比较了美国肉参（I. badionotus）、墨西哥刺参（I.fuscus）和冰岛刺参（C.frondosa）的主要活性成分;通过灌胃3种海参匀浆研究了对小鼠免疫功能的调节作用。结果表明,3种海参均具有显著的免疫调节作用,对于免疫机能低下模型小鼠,3种海参均能显著提高小鼠胸腺/体重比值（P<0.05, P<0.01）、促进小鼠脾淋巴细胞的增殖和转化（P<0.05, P<0.01）、提高小鼠血清溶血素含量（P<0.05,P<0.01）和巨噬细胞对血液中碳粒的吞噬指数（P<0.05, P<0.01）。其中,冰岛刺参在促进体液免疫和非特异性免疫方面的作用更突出,可能与其含有较高含量的皂苷和免疫活性氨基酸有关。采用ox-LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株（ECV304）损伤模型,研究日本刺参（A.japonicus）、菲律宾刺参（P.graeffei）和北极刺参（T.anax）胶原蛋白多肽对内皮细胞的保护作用。实验结果表明,不同浓度海参胶原蛋白多肽均能显著抑制ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,促进血管内皮细胞增殖（P<0.05,P<0.01）,降低细胞内MDA含量（P<0.05, P<0.01）,促进血管内皮细胞NO释放量（P<0.05, P<0.01）,提高细胞NOS活力（P<0.05,P<0.01）。提示这3种海参胶原蛋白多肽均具有保护血管内皮细胞,预防AS发生的作用。采用H2O2处理高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞（PC12）建立氧化应激损伤神经细胞体外模型,研究不同分子量的日本刺参（A.japonicus）、美国肉参（I.badionotus）和冰岛刺参（C.frondosa）胶原蛋白多肽对神经细胞的保护作用。实验结果表明,不同浓度海参胶原蛋白多肽均能显著抑制H2O2对PC12的损伤,促进细胞增殖（P<0.05,P<0.01）,降低细胞内ROS水平（P<0.05,P<0.01）,减少LDH释放量,提高细胞SOD和GSH-PX活力（P<0.05,P<0.01）。提示这3种海参胶原蛋白多肽均具有拮抗氧化应激损伤神经细胞的作用,其作用机理可能与清除活性氧自由基相关。本文首次全面系统的研究了海参胶原蛋白多肽抗氧化活性,丰富了胶原蛋白研究领域,填补了国内空白。为其应用于抗动脉粥样硬化、预防和治疗神经变性病等领域的研究奠定实验基础。