论文摘要
目的观察成年和老年大鼠脑出血后海马齿状回神经干细胞的增殖与分化,探讨脑出血后神经干细胞变化的规律。方法健康SD大鼠192只,其中成年大鼠和老年大鼠各96只,雌雄不拘。将成年和老年大鼠各随机分为正常组(18只)、假手术组(12只)和脑出血模型组(3 d、7 d、14 d、21 d、28 d,66只)。用Ⅶ型胶原酶脑内注入法制作大鼠脑出血模型,正常组和假手术组在7d处死,出血组分别在术后3 d、7 d、14 d、21 d和28 d处死。所有大鼠处死前24 h均用Brdu腹腔注射以标记增殖细胞。用Bederson评分标准对脑出血大鼠进行行为学评分,脑含水量检测,用免疫组化法检测各组Brdu标记的增殖细胞数目,用免疫双标法标记Brdu/NeuN和Brdu/GFAP阳性细胞,观察增殖细胞分化情况。结果脑出血大鼠神经行为学评分,假手术组与正常组无差异,术后各出血组均出现出血灶对侧偏瘫症状,随着时间推移,各出血组大鼠的神经功能缺损逐渐减轻。脑出血后脑含水量即开始增加,72h达高峰,以后逐渐下降,7d后水肿明显减轻。各时间点脑出血组大鼠脑组织含水量均较正常组和假手术组明显增高,具有显著性差异(P<0.05)。免疫组化检测结果显示,正常组和假手术组大鼠海马齿状回均有少量Brdu阳性细胞,正常组和假手术组无显著差异,脑出血后成年大鼠各组的Brdu阳性细胞较正常组和假手术组均明显增加(P<0.01),3 d时可见显著增加,7 d组达到峰值后逐渐下降,28 d仍高于正常组和假手术组。正常组和假手术组老年大鼠海马齿状回可见少量BrdU阳性细胞,两组比较无显著性差异(P>0.05),出血组的老年大鼠脑BrdU阳性细胞明显增加,与正常组、假手术组相比有显著性差异(P<0.01)。与成年组相比,老年大鼠各组BrdU阳性细胞明显少于成年大鼠(P<0.01)。正常成年和老年大鼠海马齿状回可见少量BrdU/NeuN和BrdU/GFAP双标阳性细胞,且成年组阳性细胞数目较老年组多;脑出血后可见成年和老年大鼠双标细胞数较正常组明显增加(P<0.01),其中成年大鼠BrdU/NeuN阳性细胞数较老年多,老年大鼠BrdU/GFAP阳性细胞数较成年多。结论①正常大鼠的海马齿状回均有少量神经干细胞增殖,成年大鼠较老年大鼠增殖能力强;②脑出血后大鼠的海马齿状回神经干细胞增殖增强,出血后7 d达到峰值,脑出血后老年大鼠神经干细胞增殖能力明显低于成年大鼠;③脑出血后大鼠的海马齿状回神经干细胞向神经元分化增多,其中成年大鼠BrdU/NeuN阳性细胞数较老年多,老年大鼠BrdU/GFAP阳性细胞数较成年多;④年龄是影响脑出血后神经干细胞增殖分化的重要因素。脑出血后,随着年龄的增长,脑内神经干细胞增殖和分化能力逐渐减弱。
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