超声激活血卟啉声动力作用抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的实验研究

论文摘要

第一部分超声激活血卟啉声动力作用抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的参数优化目的:观察超声激活血卟啉声动力作用对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的影响并优化其实验参数。方法:采用所选发育天数的鸡胚进行超声激活血卟啉声动力作用抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的实验,将CAM标本用数码相机拍照后,通过血管生成计数法检测空白对照组、单纯超声组、单纯血卟啉组及血卟啉SDT组对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管的影响,并以此确定超声参数和血卟啉剂量,观察超声激活血卟啉声动力作用抑制鸡胚CAM新生血管生成的最佳参数。加入血卟啉时应严格暗室避光操作。结果:血管计数法显示:当固定频率为1MHz,声强为1.5W,辐照时间为0s、30s、60s、90s时,各实验组CAM血管数量分别为60.08±18.48、62.27±26.02、43.66±9.38、30.19±8.75,可见单纯超声对CAM血管生成有抑制作用,且抑制作用随辐照时间增加而增强;当固定频率为1MHZ,辐照时间为90S ,声强各组分别为0w/cm2、0.5w/cm2、1.0w/cm2、1.5w/cm2,各实验组CAM血管数量分别为60.19±20.30、55.61±21.79、56.20±22.46、37.98±6.88,1.5w组与空白对照组比较差异有显著统计学意义（P<0.01）,可见当单纯超声辐照声强为1.5w/cm2时,对CAM血管生成有抑制作用;当单纯血卟啉浓度为0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml时,各实验组CAM血管数量与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.01）。说明单纯血卟啉对CAM新生血管的生成无影响;当固定频率为1MHZ,辐照时间为90s ,声强为1.5w/cm2,各组血卟啉浓度为0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml时,各实验组CAM血管数量分别为35.69±9.45、25.44±8.93、17.07±6.31、17.62±5.11。各实验组与对照组相比较差异有统计学意义,（P<0.01）,其中50μg/ml与75μg/ml组相比较差异无统计学意义,（P>0.01）。说明血卟啉SDT对CAM新生血管的生成有明显影响,当血卟啉浓度达50μg/ml时其抑制效应最大。结论:超声激活血卟啉抑声动力作用制鸡胚CAM新生血管的最佳参数为超声辐照声强为1.5 w/cm2 ,辐照时间为90S,血卟啉浓度为50μg/ml。本实验选择此最佳参数。第二部分超声激活血卟啉声动力作用抑制绒毛尿囊膜新生血管形成实验目的:观察和检测超声激活血卟啉声动力作用对新生血管形成的抑制作用。方法:采用等级评定方法、DFY软件、HE染色法观察超声激活血卟啉声动力作用对CAM新生血管形成的抑制作用。结果:等级评定结果显示:各组中鸡胚的血管生长状态等级不同,经检验发现,空白组和血卟琳组之间差异无显著统计学意义（P>0.01）,说明单纯血卟啉基本不影响血管新生;单纯超声组和血卟啉SDT组与之相比较差异均有显著统计学意义（P<0.01）,说明单纯超声组和血卟啉SDT组有明显抑制鸡胚CAM上新生血管形成的作用,其中血卟啉SDT组的3+ ,4+明显比单纯超声组增多,其差异有显著统计学意义（P〈0.01）,说明血卟啉SDT组抑制血管生成效应强于单纯超声组;DFY数据显示:空白对照组、单纯血卟啉组、单纯超声组、血卟啉SDT组的血管面积百分比分别为:88.88±7.43、85.67±9.42、74.82±16.92、60.83±11.63。与空白对照组相比,单纯超声组、血卟啉SDT组与之差异有显著统计学意义（P<0.01）;单纯超声组与血卟啉SDT组之间比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）;单纯血卟啉组与空白对照组比较差异无显著统计学意义; HE染色数据显示:空白组、单纯血卟啉组、单纯超声组、血卟啉SDT组的血管密度分别为8.50±2.57、7.21±2.05、4.82±1.43、1.59±0.26。与空白对照组相比,单纯超声组、血卟啉SDT组与之差异有显著统计学意义（P<0.01）,单纯超声组与血卟啉SDT组之间比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）,单纯血卟啉组与空白组比较差异无显著统计学意义（P>0.01）。结论:超声激活血卟啉声动力作用显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成。第三部分超声激活血卟啉声动力作用抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的机理研究目的:观察和检测超声激活血卟啉声动力作用抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的可能机理。方法:应用VEGF免疫组化的方法初步观察超声激活血卟啉声动力作用抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的作用机理。结果:免疫组化数据显示:空白组、血卟啉组、单纯超声组、血卟啉SDT组的VEGF平均光密度分别为0.46±0.07、0.40±0.10、0.26±0.05、0.14±0.07。与空白对照组相比,血卟啉组差异无显著统计学意义（P>0.01）;单纯超声组、血卟啉SDT组与之差异有显著统计学意义（P<0.01）;单纯超声组与血卟啉SDT组之间比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）。结论:超声激活血卟啉声动力作用对VEGF表达具有显著的抑制作用,这可能是其抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的机理之一。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 超声激活血卟啉抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的参数优化
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 超声激活血卟啉抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的实验研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三部分 超声激活血卟啉声动力作用抑制绒毛尿囊膜新生血管形成的机理探索
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 参考文献
• 文献综述
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文、参研项目等