论文摘要
目的探讨适合本实验室条件的O-2A 祖细胞分离培养、扩增的方法,将获得的O-2A 祖细胞移植于大鼠半横断脊髓损伤区内,探讨O-2A 祖细胞移植对脊髓损伤（SCI）的修复作用及其可能机制。方法取P1-2 天SD 大鼠大脑皮层,采用酶消化、机械吹打获取单细胞悬液,以无血清培养基加bFGF 、B27 刺激细胞增殖,进行传代;采用免疫细胞化学法分别以A2B5、GFAP 及GC 鉴定O-2A 祖细胞及其分化的2 型星形胶质细胞与少突胶质细胞。80 只SD 成年大鼠,随机分为4 组:A 组为正常组,不行SCI 手术,与其他3 组同期饲养检测指标;其他3 组均行T9脊髓左半侧离断手术,B 组为损伤对照组,脊髓损伤区内植入吸附生理盐水的明胶海绵;C 组为O-2A+T1A 组,损伤处移植50%O-2A 祖细胞和50%T1A （1 型星形胶质细胞） 悬液;D 组为O-2A 移植组,损伤处植入含有纯化O-2A 祖细胞的细胞悬液。移植术后3、7、14、21、28 天各组以CBS 及BBB 方法进行神经功能学评定;进行GAP-43、NF200 免疫组织化学标记等,观察GAP-43、NF200 在上述各组脊髓组织中的表达。结果从P1-2 天SD 大鼠大脑皮层分离纯化的细胞呈椭圆形,有典型的双极突起;免疫细胞化学染色显示A2B5 标记阳性,O-2A 祖细胞纯度95%。用含bFGF、PDGF、B27 的无血清培养基培养28 天后应用A2B5、GC 抗体标记,少突胶质细胞比率10%。O-2A 祖细胞移植术后14 天,B、C、D 组损伤侧脊髓灰质GAP-43 阳性细胞均较A 组有不同程度增加（P﹤0.05）,其中D 组较B、C 组增加更显著（P﹤0.01）,C 组与B 组差异显著（P﹤0.05）;C、D 组损伤侧脊髓灰质NF200 阳性细胞均较B 组有不同程度增加（P﹤0.05）,其中D 组高于C 组（P﹤0.05）,C 组与B 组差异显著（P﹤0.05）;A 组后肢改良联合行为得分为100,BBB 运动功能评分为21分。O-2A 祖细胞移植术后3、7、14、21、28 天,B、C、D 组动物后肢神经功能均有不同程度的恢复, B、C、D 左后肢得分明显低于右侧（P﹤0.01）,D 组与B、
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