论文摘要
目的探讨血管紧张素转换酶（ACE）2过表达后对血管紧张素II1型受体（AT1R）和细胞外基质激酶（ERK）1/2磷酸化水平及细胞增殖的影响，进一步探究ACE2与血管紧张素II之间的相互作用关系，明确ACE2对平滑肌细胞增殖影响的机制。方法SD大鼠胸主动脉平滑肌离体细胞原代以及传代培养；利用293T细胞浓缩和扩增慢病毒表达载体并采用稀释法测定其病毒滴度；将载有ACE2基因慢病毒表达载体（Lentiviral-ACE2）以转染复数为10（MOI=10）转染平滑肌细胞，分别在mRNA水平和蛋白水平检测其转染效率并且在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达；AngII分别在不同时间以及不同作用浓度下干预平滑肌细胞，使用免疫印迹法检测SD大鼠固有的ACE2表达水平；免疫印迹法检测ACE2过表达后对AT1受体表达及ERK1/2磷酸化的的影响；采用CCK-8法检测ACE2对平滑肌细胞增殖的影响。结果成功的培养和鉴定了离体培养的SD大鼠平滑肌细胞；成功浓缩和扩增慢病毒表达载体并且测得慢病毒滴度为2x106TU/L；载有ACE2基因的慢病毒转染细胞不同时间（24、48、72、96h）后其蛋白表达量较对照组和空载体组显著升高，（1.22±0.06vs0.53±0.03和0.53±0.09，p<0.05，n=4），同时ACE2mRNA较对照组和空载体组显著增加；AngII干预平滑肌细胞12小时后能有效下调平滑肌细胞ACE2蛋白的表达并且最适浓度为10-7mol/L；ACE2能够显著抑制AngII诱导的平滑肌细胞增殖（0.68±0.03vs0.53±0.10, p<0.05，n=5）,并且在无外源性AngII作用时也具有抑制平滑肌细胞增殖的作用；AngII （10-7mol/L）作用平滑肌细胞12小时后AT1R显著上调（0.24±0.01vs0.12±0.01，p<0.05），同时ACE2蛋白过表达显著抑制AngII诱导的AT1受体的上调（0.72±0.08vs0.34±0.07，p<0.05，n=4）；AngII干预平滑肌细胞5min后ERK1/2的磷酸化水平显著升高，ACE2能够显著抑制AngII诱导的ERK1/2的磷酸化水平（0.71±0.08vs0.43±0.06，p<0.05），同时载有ACE2基因的慢病毒感染平滑肌后也有抑制ERK1/2的磷酸化。结论ACE2可以通过下调AT1受体以及ERK1/2的磷酸化水平而抑制平滑肌增殖，具有血管保护作用，提示ACE2很可能成为心血管治疗的新靶点。
论文目录
相关论文文献
- [1].关于子宫肌瘤的几个问题[J]. 人人健康 2017(11)
- [2].晚期糖基化终末产物调控平滑肌细胞钙化的机制研究[J]. 中国全科医学 2017(20)
- [3].支架植入后抑制平滑肌细胞过度增殖的研究进展[J]. 中国医药导报 2020(07)
- [4].敲除Wdr1抑制小鼠原代血管平滑肌细胞的迁移和增殖[J]. 生物技术通报 2018(12)
- [5].姜黄素对大鼠肺微血管平滑肌细胞周期和增殖能力的影响[J]. 中国分子心脏病学杂志 2010(05)
- [6].虾青素对氧化应激下平滑肌细胞自噬与凋亡的影响[J]. 武汉大学学报(医学版) 2020(02)
- [7].实验兔动脉瘤模型的建立及瘤壁平滑肌细胞的变化[J]. 江苏医药 2012(10)
- [8].蜂胶水提物对平滑肌细胞胆固醇酯聚集的影响[J]. 中国动脉硬化杂志 2009(07)
- [9].IGF-1诱导PI3K-Akt通路磷酸化对平滑肌细胞的作用[J]. 福建医药杂志 2012(02)
- [10].子痫前期血清对滋养-平滑肌细胞共培养体系平滑肌细胞凋亡的影响[J]. 现代妇产科进展 2010(09)
- [11].抑瘤素M的研究进展[J]. 中华老年多器官疾病杂志 2016(12)
- [12].大鼠平滑肌细胞培养研究进展与分析[J]. 贵阳中医学院学报 2019(03)
- [13].Toll样受体4在氧化低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞中介导了炎症因子分泌[J]. 中国病理生理杂志 2014(10)
- [14].豚鼠不同部位微动脉平滑肌细胞电生理学特性的比较[J]. 生理学报 2010(05)
- [15].正五聚素蛋白3在氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞中的表达[J]. 中华老年心脑血管病杂志 2017(11)
- [16].肌条法与捣碎法分离培养鼠子宫平滑肌细胞效果对比研究[J]. 九江学院学报(自然科学版) 2016(02)
- [17].连接蛋白43在猪冠状动脉平滑肌细胞表型转换中的作用[J]. 中国老年学杂志 2014(07)
- [18].PDGFR-β在不同年龄牦牛肺中分布和表达的研究[J]. 畜牧兽医学报 2020(07)
- [19].钙离子跨缝隙连接在内皮细胞与平滑肌细胞间传递的研究[J]. 中国病理生理杂志 2012(11)
- [20].早产、足月胎兔动脉导管平滑肌细胞中胱硫醚-γ-裂解酶mRNA表达及意义[J]. 湖北医药学院学报 2011(06)
- [21].平滑肌细胞移植对心肌梗死后早期心肌基质金属蛋白酶2、9和抑制因子3含量的影响[J]. 中国胸心血管外科临床杂志 2010(03)
- [22].含血栓的曲张静脉管壁内皮和平滑肌细胞的电镜改变[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2011(11)
- [23].子宫腺肌病子宫内膜-肌层交界区平滑肌细胞中Lin28表达及对细胞增殖影响研究[J]. 中国实用妇科与产科杂志 2020(12)
- [24].阿魏酸、绿原酸对血管平滑肌细胞黏附的影响[J]. 辽宁中医杂志 2015(06)
- [25].猪冠状动脉平滑肌细胞的分离、培养及鉴定[J]. 河南师范大学学报(自然科学版) 2014(01)
- [26].原代肠系膜动脉平滑肌细胞的分离培养[J]. 中南医学科学杂志 2018(02)
- [27].FGF-2激活平滑肌细胞转录因子Runx2以促进其成骨性分化[J]. 生理科学进展 2010(04)
- [28].蛛网膜下腔出血后脑基底动脉平滑肌细胞离子通道的变化[J]. 国际神经病学神经外科学杂志 2011(06)
- [29].兔静脉血管内皮及平滑肌细胞原代培养方法的改进及鉴定[J]. 山东医药 2008(27)
- [30].糖基化终末产物损伤冠状动脉平滑肌细胞K_v通道[J]. 首都医科大学学报 2016(06)
标签：基因转染论文; 血管紧张素型受体论文; 细胞增殖论文;