甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组种间杂交的研究

论文摘要

选育抗线虫病的蔬菜品种是控制线虫危害的一条重要途径。针对十字花科植物芸薹属内缺乏线虫抗源的现状,利用具有线虫抗性的甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系do、芸薹属A基因组蔬菜A3和A1及附加系do与A1之间的F1代杂种为材料,通过种间有性杂交及回交途径将具有线虫抗性的萝卜d染色体导入到芸薹属作物中,从而获得含萝卜d染色体的种质材料,主要研究结果如下:1.甘蓝型油菜附加系do与芸薹属A基因组间有性杂交后代的获得甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组间的有性杂交容易实现,仅通过去雄后辅助人工授粉便可成功实现正反交,获得F1杂种及回交后代。do与菜心A3间正反交的亲和指数分别达到1.79和1.73,平均角粒数为2粒,do与大白菜A1间回交的亲和指数为0.28,平均角粒数不到1粒;正交do×A3和回交dA1×A1得到的种子发育比较饱满,发芽率也比较高,达到85%以上,反交A3×do得到的种子发育情况较差,大约只有一半的种子可以发芽。2.杂种及杂种后代的鉴定经RAPD标记和SSR标记鉴定,正交杂种均含有萝卜d染色体,且均为真杂种,而反交杂种中出现了部分不含萝卜d染色体的假杂种,另外从46份BC1代回交种中筛选出了7株具有萝卜d染色体的材料;F1代真杂种生长发育正常,性状表现偏向于附加系do,并可产生花粉,BC1代杂种生长发育也正常,但其性状表现出现了明显分离,一部分材料开始偏向于A1,另一部分则仍偏向于附加系do;F1代真杂种细胞中的DNA相对含量介于其双亲之间,但不同杂种细胞的DNA相对含量并不完全一致,部分反交种的细胞DNA相对含量偏高,回交种细胞的DNA相对含量彼此不一致,大都介于A1和dA1之间,但也有材料的细胞DNA相对含量在dA1附近。3.杂种及杂种后代花粉活力的测定大粒花粉为具有活力的花粉,经醋酸洋红染色后变成深红色,而绝大多数小粒花粉则无活力,经醋酸洋红染色后呈现淡红色或无色;亲本的花粉粒以大花粉粒为主,小粒花粉则很少,花粉活力在90%以上,而F1代杂种及回交后代则具有相对较多的小粒花粉,花粉活力明显低于亲本;正反交杂种的花粉活力存在一定差异,其中正交种的花粉活力比较一致,约为40%,而部分反交种的花粉活力相对偏高,达到65%左右;BC1代的花粉活力在40%附近变化,但也有材料的花粉活力与dA1相比明显下降,只有26%左右。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 芸薹属植物抗线虫病育种的研究意义
• 1.2 实现芸薹属植物抗线虫病种质资源创新的技术途径
• 1.3 植物远缘杂交障碍及其克服方法
• 1.3.1 受精前的障碍及克服方法
• 1.3.2 受精后的障碍及克服方法
• 1.4 芸薹属植物远缘杂交研究进展
• 1.4.1 属间远缘杂交
• 1.4.2 种间远缘杂交
• 1.5 远缘杂交后代的鉴定
• 1.5.1 形态学鉴定
• 1.5.2 细胞学鉴定
• 1.5.3 原位杂交技术
• 1.5.4 同工酶鉴定
• 1.5.5 分子标记鉴定
• 第二章 引言
• 第三章 试验材料与方法
• 3.1 试验材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 授粉杂交
• 3.2.2 杂种鉴定
• 3.2.3 花粉活力测定
• 第四章 结果与分析
• 4.1 杂种及杂种后代的获得
• 4.2 杂种及杂种后代的鉴定
• 4.2.1 分子标记鉴定
• 4.2.2 形态学鉴定
• 4.2.3 细胞DNA相对含量的测定
• 4.2.4 花粉活力的测定
• 第五章 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 发表论文及参加课题