DDRT-PCR筛选辐射致癌差异表达基因的研究

论文摘要

核能在国民经济和军事领域中应用越来越为广泛,电离辐射对人类的潜在危害也在不断的增长,辐射致癌是最重要的电离辐射远后效应之一,对辐射致癌分子机理进行研究,是放射生物学、防原医学、预防医学与辐射防护学探讨的重点,其研究成果涉及能源利用、环境与战争,因而具有重要的社会、军事、经济与政治意义。 大量的研究表明辐射可导致基因突变或者染色体畸变,进而启动细胞恶性转化,细胞恶性转化主要是基因突变、基因表达积累的结果,因此阐明辐射致细胞恶性转化的机理需要从基因水平进行研究。已有的研究局限于为数不多的已知重要基因、抑癌基因如:p53、c-myc、H,K,H-ras、Rb端粒酶等基因在各种模型中的表达及突变情况,具有片面性。因为不可能通过数个基因的情况而了解细胞恶性转化的整个过程,而且辐射致癌或者致细胞恶性转化本身就存在相当的复杂性与异质性。因此阐明辐射致癌机理需要从整体的角度,全面识别正常细胞与相应恶传细胞之间的差异表达基因,寻找未知的参与细胞恶性转化过程的基因。随着分子遗传学技术的快速发展,尤其是mRNA差异显示技术创建以来,规模性识别不同功能状态细胞之间的差异表达基因在技术上成为可能。 mRNA差异显示技术是九十年代发展起来的一种新的细胞基因表达差异分析方法,又称差异显示反转录PCR（DDRT-PCR）,其基本原理是通过利用3′端的锚定引物和5′的随机引物进行反转录PCR,扩增mRNA的3′末端,由于5′端的随机引物较短,能与多种cDNA配

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 辐射致癌裸鼠肿瘤移植模型的建立
• 前言
• 材料
• 方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 DDRT-PCR筛选辐射致癌差异表达基因
• 前言
• 材料
• 方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 时间分辨荧光在蛋白电泳中的初步应用
• 前言
• 材料
• 方法
• 结果
• 讨论
• 总结
• 参考文献
• 综述
• 已形成和发表文
• 致谢