从大豆胚芽中分离纯化大豆皂甙B的工艺研究

论文摘要

大豆皂甙是三萜类的皂甙,它是一种两性分子。大豆皂甙主要分为两大类：皂甙A和皂甙B,皂甙A较皂甙B苦味大,因此本文主要研究制备大豆皂甙B的工艺并进行了中试放大。本论文主要有提取条件优化,树脂纯化和结晶三个方面。1.通过对乙醇浓度,料液比,提取时间和提取温度进行优化得到了最优的提取条件：料液比1:20,溶剂70%的乙醇,70℃下提取3h。该提取方法所得大豆皂甙B的提取率为90%,测的大豆皂甙中大豆皂甙B为1.71%。2.建立了大孔吸附树脂纯化皂甙的方法,分别考察了D101、NKA、ZTC-1、HP20,HZ-818、HPD-100、HZ-816和AB-8八种树脂。将八种树脂进行了静态吸附,洗脱和洗脱率的比较,结果显示,HPD-100的吸附量,解析量和解吸率分别是15.698mg/g,14.12mg/g和90.5%,而NKA的吸附量,解析量和解吸率分别是14.813mg/g,13.99mg/g和97.1%。虽然HPD-100的吸附量高但解吸率低,因此选择NKA树脂。对NKA树脂的上样浓度、洗脱浓度等进行了优化,得出最佳的上样浓度为1.69mg/ml,NKA树脂先用2BV的20%的醇除去杂质,然后用2.5BV80%的醇洗脱产物,得到总皂甙的纯度为55.6%,回收率为75.2%,大豆皂甙B纯度为20%,回收率为88%。3.建立了2步结晶法进一步纯化大豆皂甙B的工艺。通过比较乙醇、甲醇、异丙醇、去离子水等结晶溶剂选取去离子水做为结晶溶剂为。第一步结晶条件为：大豆皂甙B初始浓度是10mg/ml,降温速率3℃/h,最终温度是20℃,析晶时间0h。重结晶：大豆皂甙B初始浓度为15mg/ml,降温速率3℃/h,最终温度是20℃,析晶时间0h。经过两步结晶,皂甙B的纯度达到了83.19%,回收率为53.89%。将该工艺进行中试放大,得到大豆皂甙B纯度为79.23%,总回收率为14.04%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 前言
• 1.2 大豆皂甙的概述
• 1.2.1 大豆皂甙的结构及其分布
• 1.2.2 大豆皂甙B的理化性质
• 1.2.2.1 物理性质
• 1.2.2.2 化学性质
• 1.2.3 大豆皂甙B的生物活性及前景
• 1.2.3.1 抗氧化,减少过氧化的脂质的形成
• 1.2.3.2 降血脂,抗血栓的作用
• 1.2.3.3 抗病毒的作用
• 1.2.3.4 增强免疫调节的功能
• 1.2.3.5 肝的保护功能
• 1.2.3.6 抗肿瘤的作用
• 1.2.3.7 别的生物活性
• 1.2.3.8 应用前景
• 1.3 大豆皂甙B的主要提取方法
• 1.3.1 溶剂提取
• 1.3.2 超声波提取
• 2流体萃取方法'>1.3.3 超临界CO₂流体萃取方法
• 1.3.4 微波辅助提取
• 1.4 大豆皂甙B的分离与纯化
• 1.4.1 萃取法
• 1.4.2 溶剂沉淀法
• 1.4.3 铅盐沉淀法
• 1.4.4 大孔树脂纯化法
• 1.4.5 硅胶柱层析及其他柱层析
• 1.4.6 制备高效液相色谱法
• 1.4.7 逆流色谱
• 1.4.8 结晶法
• 1.5 大豆皂甙B的检测方法
• 1.5.1 比色法
• 1.5.2 紫外分光光度法
• 1.5.3 薄层色谱法
• 1.5.4 高效液相色谱法
• 1.6 选题的意义与研究内容
• 1.6.1 选题的意义
• 1.6.2 研究内容
• 第二章 大豆皂甙B的分析与提取
• 2.1 大豆皂甙的检测方法
• 2.1.1 实验的原材料与仪器
• 2.1.2 大豆皂甙定性的检测方法
• 2.1.3 大豆皂甙定量的检测方法
• 2.1.3.1 皂甙的酸解条件
• 2.1.3.2 色谱条件确定
• 2.1.4 标准曲线绘制
• 2.1.5 精密度的实验结果
• 2.1.6 回收率的实验结果
• 2.1.7 实验的结果
• 2.2 大豆皂甙B的提取
• 2.2.1 实验的原材料与仪器
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.3 实验的原理
• 2.2.4 提取条件优化
• 2.2.4.1 乙醇浓度的优化
• 2.2.4.2 料液比的优化
• 2.2.4.3 提取温度的优化
• 2.2.4.4 提取时间的优化
• 2.3 本章总结
• 第三章 大孔吸附树脂纯化大豆皂甙B的工艺研究
• 3.1 前言
• 3.2 实验的原材料与仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 大孔树脂预处理
• 3.3.2 8种树脂的参数
• 3.3.3 筛选树脂的实验
• 3.3.3.1 8种树脂的静态和动态试验
• 3.3.3.2 HPD-100和NKA树脂的动力学实验
• 3.3.4 NKA树脂的等温吸附实验
• 3.3.5 NKA树脂吸附动态的研究
• 3.3.5.1 上样浓度的确定
• 3.3.5.2 流速的确定
• 3.3.5.3 柱体积的确定
• 3.3.5.4 洗脱浓度的确定
• 3.3.5.5 20 %醇洗脱体积的确定
• 3.3.5.6 洗脱曲线的测定
• 3.4 本章总结
• 第四章 结晶法纯化大豆皂甙B的工艺研究
• 4.1 前言
• 4.2 实验的原材料与仪器
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 膜分离法
• 4.3.2 凝胶分离法
• 4.3.3 溶剂沉淀法
• 4.3.4 结晶法
• 4.3.4.1 结晶溶剂的选择
• 4.3.4.2 结晶初始浓度的优化
• 4.3.4.3 结晶最终温度的控制
• 4.3.4.4 降温速率的优化
• 4.3.4.5 结晶时间的优化
• 4.3.4.6 重结晶
• 4.3.5 中试放大
• 4.4 本章小结
• 第五章 结论和展望
• 5.1 本文结论
• 5.2 本文的创新点
• 5.3 展望
• 参考文献
• 附录一 实验原材料与药品
• 附录二 实验仪器
• 致谢
• 研究成果及发表的学术论文
• 作者和导师简介
• 硕士研究生学位论文答辩娄员会决议书