HBV对肝癌中MMP-2及NM23表达的影响

论文摘要

目的:肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。大约80%的HCC与乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染有关。乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein,HBx）与HCC的发生与发展密切相关。MMP-2与多种肿瘤的浸润侵袭有关。在肝癌侵袭转移过程中,其表达产物不仅可以酶解细胞间基质成分还能酶解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原。而NM23作为第一个被人们发现的抑癌基因而得到人们的广泛关注。与多种人类肿瘤的侵袭、转移相关,可以作为评估肿瘤的转移和患者预后的指标。通过深入研究NM23与MMP-2在HBV感染型与HBV非感染型肝癌中的表达及差异,进一步探讨乙肝病毒感染与肝癌侵袭、转移之间的关系,为临床预防和治疗肝癌提供依据。方法:1.病理标本收集取我院病理科1996年9月至2002年3月间经手术切除及病理证实的HCC标本56例。其中男48例,女8例,中位年龄50.3 （21～73）岁。HCC组织依照Edmondson标准分级,Ⅰ级1例、Ⅱ级18例,Ⅲ级36例、Ⅳ级1例。将有血管侵犯、肝内卫星癌灶、淋巴结转移以及远处转移的HCC患者定为高侵袭转移组,反之定为低侵袭转移组。58例HCC患者中,高侵袭转移组38例,低侵袭转移组18例;2.将病理切片应用MaxVision TM快速免疫组化方法二步法检测标本中MMP-2,NM23蛋白及HBsAg蛋白的表达,采用χ2检验及spearman秩相关进行统计学分析。探讨MMP-2、NM23在HCC中的表达及其与HBV感染的关系;3.选用HBV表达阴性的细胞株HepG2和HepG2来源的稳定转染HBV基因并持续表达HBV的细胞株HepG2.215,进行培养。应用Western Blot和免疫细胞化学法检测MMP-2,NM23在两组细胞株中的表达,进行比较。结果:1.免疫组化法检测结果显示,56例肝癌组织中MMP-2和NM23阳性表达率分别为62.50%（35/56）、32.15%（18/56）。MMP-2和NM23阳性表达强度与肿瘤的分化程度、侵袭转移能力密切相关;在HBsAg阳性组中MMP-2的阳性率高于HBsAg阴性组中的表达,而NM23的阳性率低于HBsAg阴性组中的表达。且具有组间差异（P <0.05）。在36例HBsAg阳性的肝癌组织中,有26例MMP-2呈阳性表达。在20例HBsAg阴性的肝癌组织中,有11例MMP-2呈阴性表达。统计学分析显示有相关性（r = 0.269, P <0.05）。在36例HBsAg阳性的肝癌组织中,有8例NM23呈阳性表达。在20例HBsAg阴性的肝癌组织中,有10例NM23呈阴性表达。统计学分析显示有相关性（r = -0.285, P <0.05）。2.Western Blot检测MMP-2,NM23的表达结果显示,MMP-2,NM23蛋白在HepG2细胞和HepG2.215细胞中均有表达;其中MMP-2在HepG2.215细胞中的蛋白含量明显低于HepG2细胞（P <0.05）,而NM23在HepG2.215细胞中的蛋白含量明显低于HepG2细胞（P <0.05）,β-actin的表达则无明显差异。3.免疫细胞化学结果显示,肝癌细胞株HepG2.215与HepG2细胞株相比较,其MMP-2表达的水平明显升高（ P <0.01 ）,而NM23表达的水平却明显下降（ P <0.01 ）,与Western Blot结果一致。结论:MMP-2和NM23的表达水平能反映HCC的分化程度和侵袭转移能力。MMP-2在HBsAg阳性的肝癌中的高表达和NM23在HBsAg阳性的肝癌中的低表达,提示长时间的HBV感染可能会改变转移相关基因的表达,有可能会导致肝癌细胞扩散转移。MMP-2在HepG2.215中高表达而NM23在HepG2.215中低表达,与组织学的结果相符合,进一步证实了HBV感染与MMP-2,NM23表达存在相关性。有助于揭示HBV感染致HCC的发生和转移机制。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 一、 肝癌病因的研究进展
• 二、肝癌转移的研究进展
• 正文
• 实验
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢