蚊抗药性相关新基因 ——视蛋白基因(NYD-OP7)克隆、序列分析及表达载体构建

蚊抗药性相关新基因 ——视蛋白基因(NYD-OP7)克隆、序列分析及表达载体构建

论文摘要

[目的] 在淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中鉴定视蛋白基因(NYD-OP7)的表达差异,获取NYD-OP7全长序列,并构建NYD-OP7原核和真核表达载体,为进一步研究奠定基础。 [方法] 用荧光定量PCR法鉴定NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中的表达差异。用RT-PCR法从抗性品系中扩增NYD-OP7全长序列,对NYD-OP7编码的蛋白用BlastX软件在NCBI和SwissProt数据库中进行同源性比对,用Clustalw软件进行聚类分析,用EMBL pI/Mw tool计算等电点和分子量,Signl3.0软件进行信号肽分析,ProtScale软件进行疏水性分析,PSORT Ⅱ软件进行细胞定位分析,PatSearch软件进行基序分析,SMART软件进行蛋白质结构域分析。通过基因重组方法构建NYD-OP7原核和真核表达载体。 [结果] 荧光定量PCR结果显示,NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中的表达量是敏感品系的9.78倍。获得淡色库蚊NYD-OP7完整开读框序列,为1116bp,经推导编码371个氨基酸(GenBank/NCBI AY749413,2004),与淡色库蚊NYD-OP1~6基因编码的视蛋白同源性最高,为91~93%。成功构建NYD-OP7原核和真核表达载体。 [结论] NYD-OP7在淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系中高表达,提示NYD-OP7与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关,值得进一步研究。

论文目录

  • 一、摘要
  • 1.中文摘要
  • 2.英文摘要
  • 二、正文
  • 1.前言
  • 2.材料与方法
  • 3.结果
  • 4.讨论
  • 三、小结
  • 四、主要参考文献
  • 五、致谢
  • 昆虫抗药性检测的研究进展
  • 淡色库蚊视蛋白基因(NYD-OP7)GenBank收录证明
  • 论文独创性声明
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