论文摘要
电压依赖性钾通道Kv2.1增加粘着斑激酶磷酸化调控肿瘤细胞粘附和迁移 目的: 肿瘤细胞的粘附和迁移是肿瘤转移和浸润的关键步骤,因此研究细胞粘附和迁移对肿瘤细胞的生物学活性以及肿瘤的治疗尤为关键;粘着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK）是一种非受体蛋白酪氨酸激酶,目前认为主要参与细胞的运动,包括细胞迁移（Migration）和粘附（Adhesion）,FAK的主要调节方式是依赖整合素（Integrin）和细胞外基质的粘附,从而促进其自身磷酸化,促进细胞运动,许多细胞外刺激如细胞外基质蛋白、生长因子、神经肽以及机械刺激均可以诱导FAK发生磷酸化。钾离子通道蛋白作为一种细胞膜蛋白,广泛存在于各种肿瘤细胞上,参与细胞外信号向细胞内传导,并有研究表明,与肿瘤细胞的发生、发展和转移有着密切的关系。Kv2.1为电压依赖性外向型钾通道（Voltage-gated potassium channel）,通常以簇团样分布于细胞膜表面调节细胞的兴奋性,已有研究表明Kv2.1存在于多种肿瘤细胞的中,但其在肿瘤中的生物学活性的调控的确切机制目前尚未明确。尽管目前对于位于细胞膜表面的离子通道蛋白kv2.1和位于细胞膜下的非受体激酶FAK的研究比较多,但对于其两者之间的相互作用,目前尚未见报导。本研究通过对kv2.1和FAK的相互作用的研究,旨在发现一种全新的细胞运动调控机制,为肿瘤的诊断以及治疗提供一条新的思路。 方法: 1.细胞株:两种肿瘤细胞株Hela（宫颈癌细胞）和SK-Hep-1（肝癌细胞）;中国仓鼠卵巢细胞（无内源性钾通道蛋白表达）;FAK+/+纤维母细胞（粘着斑激酶过表达）;CHO-Kv2.1及CHO-DNKv2.1（稳定转染Kv2.1基因和功能域突变（dominant negative,DN）Kv2.1基因）。 2.表达质粒的构建:设计相应的两端含有一定酶切位点的引物后,用高保真Taq酶进行PCR技术扩增;将扩增后的DNA片断装入TA载体（TOPO）中;经过感
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标签：电压依赖性钾通道论文; 粘着斑激酶论文; 粘附论文; 迁移论文; 磷酸化论文;