含油土壤中生物破乳菌的筛选及破乳效果研究

论文摘要

目前,大部分油田都进入高含水期,加上各种化学驱油剂的使用,使从油层中采出的不仅仅是地层中的原油,而是较为复杂的乳状液,单纯的静置沉降并不能达到油水分离的要求,而现有的化学破乳剂,不易降解且对环境有污染、对人有毒害,随着生物技术的发展,人们把目光转向了对环保型的生物破乳剂的研究。国内外学者对生物破乳剂进行了大量研究,但对于生物破乳剂菌的快速筛选方法以及生物破乳剂的提取等研究还不多见。因此本文在现有研究的基础上,根据生物破乳剂所具有的特性,从受石油长期污染的土壤中筛选出能以烃类物质为碳源进行生长的菌株,建立了快速筛选生物破乳菌的体系并筛选得到的具有较高破乳能力和较好的传代稳定性的WSJ-3菌,经过初步鉴定为枯草芽孢杆菌菌属。确定了WSJ-3菌培养的最优条件为液体石蜡和葡萄糖的双碳源培养基,培养基pH值为7.0,培养温度为37℃,培养时间为72小时。WSJ-3生物破乳菌发酵培养后,经超声波破碎后,再用离心沉降、溶剂萃取及干燥相结合的方法有效的提取了WSJ-3生物破乳剂。通过生物破乳剂及其复配体系对大庆联合站原油破乳实验发现,WSJ-3生物破乳剂相对于化学破乳剂而言破乳率高、脱出水清晰,但破乳速率慢。生物破乳剂与化学破乳剂复配能达到更高的破乳效果,这说明WSJ-3生物破乳剂与化学破乳剂存在着协同作用。本文研究对指导新型高效生物破乳剂产品的开发,具有十分重要的理论意义和应用价值。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 创新点摘要
• 第一章 绪论
• 1.1 研究目的和意义
• 1.2 研究现状
• 1.3 课题研究背景
• 1.3.1 生物破乳剂的来源
• 1.3.2 生物破乳剂破乳效果检测方法
• 1.3.3 生物破乳剂的破乳能力评价方法
• 1.4 生物破乳剂的破乳机理
• 1.4.1 生物破乳剂的破乳过程
• 1.4.2 生物破乳剂的破乳机理
• 1.5 本文研究内容与技术路线
• 1.5.1 研究的主要内容
• 1.5.2 研究的技术路线
• 第二章 含油土壤中生物破乳菌的分离纯化及筛选方法
• 2.1 含油土壤中生物破乳菌的分离方法
• 2.1.1 连续稀释倒平板分离法
• 2.1.2 梯度稀释涂布法
• 2.1.3 平板划线分离法
• 2.2 含油土壤中生物破乳菌的定向培养与纯化方法
• 2.2.1 含油土壤生物破乳菌的定向培养
• 2.2.2 含油土壤中生物破乳菌的纯化方法
• 2.3 含油土壤中生物破乳菌的筛选方法
• 2.3.1 依据菌株产生活性物质性质的强弱的筛选方法
• 2.3.2 依据代谢产物及细菌全培养液的表面活性的筛选方法
• 2.3.3 依据原油模拟乳状液破乳性能的筛选方法
• 2.4 含油土壤中生物破乳菌的保藏方法
• 2.4.1 斜面传代保藏法
• 2.4.2 半固体穿刺保藏法
• 2.4.3 石蜡油封藏法
• 2.5 含油土壤中生物破乳剂的提取方法
• 2.5.1 经典的生物破乳剂提取方法
• 2.5.2 近年发展的生物破乳剂提取方法
• 2.6 小结
• 第三章 含油土壤中生物破乳菌的筛选
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 菌种来源
• 3.1.2 培养基
• 3.1.3 模拟乳状液破乳实验
• 3.1.4 实验仪器
• 3.2 含油土壤中生物破乳菌的筛选实验
• 3.2.1 含油土壤中生物破乳菌的分离
• 3.2.2 含油土壤中生物破乳菌的纯化
• 3.3 含有土壤中生物破乳菌的特征和鉴定
• 3.3.1 生物破乳菌的菌落特征
• 3.3.2 生物破乳菌的革兰氏染色实验
• 3.4 小结
• 第四章 生物破乳菌生长及破乳性能影响因素研究
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 菌源
• 4.1.2 培养基
• 4.1.3 模拟乳状液破乳实验
• 4.1.4 实验温度
• 4.1.5 实验仪器
• 4.2 生物破乳菌遗传稳定性研究
• 4.3 影响生物破乳菌生长及破乳效果因素研究
• 4.3.1 碳源对生物破乳菌生长及破乳效果的影响
• 4.3.2 菌龄对生物破乳菌生长及破乳效果的影响
• 4.3.3 pH 值对生物破乳菌生长及破乳效果的影响
• 4.3.4 温度对生物破乳菌生长及破乳效果的影响
• 4.4 小结
• 第五章 生物破乳剂及其复配体系实验研究
• 5.1 实验材料
• 5.1.1 菌源
• 5.1.2 培养基
• 5.1.3 实验用乳状液
• 5.1.4 实验仪器
• 5.2 生物破乳剂的提取
• 5.2.1 生物破乳菌不同组分的破乳效果研究
• 5.2.2 生物破乳剂的提取
• 5.3 生物破乳剂及其复配体系的破乳实验
• 5.3.1 生物破乳剂及其复配体系配方
• 5.3.2 原油粘温曲线的测定
• 5.3.3 生物破乳剂及其复配体系破乳效果
• 5.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 致谢
• 详细摘要