骨形态发生蛋白和转化生长因子β诱导成骨的协同作用

论文摘要

本实验应用不同浓度的盐酸胍和尿素反复溶解沉淀蛋白质的方法从牛骨中分离制备骨形态发生蛋白（BMP）,以及应用酸醇法从猪血小板中提取制备转化生长因子β（TGF-β）,并将制备的样品植入小鼠股部肌肉内进行诱导成骨实验,旨在探索BMP诱导成骨的最佳方式。实验结果如下: （1） 相同条件下,使用载体比无载体具有更强的诱导能力,合适载体的使用会使诱导实验取得更好的效果; （2） BMP与TGF-β联合使用比单独使用BMP具有更好的诱导成骨效果,表明BMP的诱导只是启动过程,TGF-β可促进诱导物进一步分化增殖; （3） 从载体组的诱导使用可以看出,新骨形成后,其碱性磷酸酶的活性降低,表明此时新生细胞表达减弱,合成有机质降低;而从钙的变化可看出,此时更多的是无机质的形成,即骨中钙盐的沉积; （4） 通过细胞生物学实验同样证明BMP与TGF-β联合使用比单独使用BMP具有更好的诱导成骨效果,而且可以验证骨的修复再生来源于间充质干细胞。 综上所述,BMP诱导成骨的最佳条件是,使用合适的材料作为载体,同时与其他生长因子联合应用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 骨中的生物活性物质研究进展
• 1.1.1 骨形态发生蛋白
• 1.1.2 转化生长因子β
• 1.1.3 成纤维细胞生长因子
• 1.1.4 胰岛素样生长因子
• 1.1.5 血小板衍生生长因子
• 1.1.6 激素
• 1.2 骨生理特征与骨折愈合关系的研究进展
• 1.2.1 骨的生理结构
• 1.2.2 骨的形成和吸收
• 1.2.3 骨折愈合机制
• 1.2.4 生长因子在骨折愈合中的作用
• 1.3 实验的目的与意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 制剂制备用材料
• 2.1.3 实验主要试剂
• 2.1.4 实验器械
• 2.1.5 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验方案总体设计
• 2.2.2 BMP的制备方法
• 2.2.3 TGF-β的制备方法
• 2.2.4 骨诱导实验
• 2.2.5 细胞水平诱导实验方法
• 2.3 数据处理
• 3 实验结果
• 3.1 样品制备
• 3.1.1 BMP制备
• 3.1.2 TGF-β制备
• 3.2 骨诱导实验
• 3.2.1 特征性生化指标检测
• 3.2.2 X线检测
• 3.3 细胞水平诱导分化实验
• 4 讨论
• 4.1 BMP和TGF-β的性质与其分离制备的关系
• 4.2 骨的发生与BMP和TGF-β诱导成骨
• 4.2.1 BMP和TGF-β与诱导骨的生成
• 4.2.2 载体在诱导成骨中的作用
• 4.3 未分化的骨髓间充质干细胞与诱导成骨
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士期间发表的学术论文