登革病毒2型诱导血管内皮细胞凝血与纤溶相关分子表达的研究

论文摘要

登革病毒2型诱导血管内皮细胞凝血与纤溶相关分子表达的研究 研究背景和目的:登革出血热/登革休克综合征（Dengue haemorrhagic fever/Dengue shock syndrome,DHF/DSS）主要临床表现包括出血、血管通透性升高与低血容量性休克等,提示其发病机制可能涉及止血缺陷。血管内皮细胞（vein endothelial cells,VECs）在调节血管渗透性和维持血液生理状态等方面起重要作用,（Dengue virus,DV）登革病毒能够感染人VECs,但DV对VECs的促凝和抗凝活性是否存在影响尚不清楚。 VECs能够合成分泌组织因子（tissue factor,TF）、组织因子抑制物（tissue factor inhibitor,TFPI）、血栓调节蛋白（thrombomodulin,TM）、组织纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator,tPA）和组织纤溶酶原激活物抑制物1（tisslle plasrninogen activator inhibitor type-1,PAI-1）等多种重要分子,参与凝血级联反应和纤溶系统平衡。VECs有序合成这些分子对维持血流生理状态起关键作用。在本研究中,应用DV2感染人脐静脉血管内皮细胞（human umbilica vein endothelial cells,HUVECs）,观察DV2对HUVECs表达组织因子（TF）、组织因子抑制物（TFPI）和血栓调节蛋白（TM）以及组织纤溶酶原激活物（tPA）和纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的影响,以探索血管内皮细胞在DHF/DSS的出血和血浆外渗等重要的病理生理过程所起的作用。 方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第二、三代细胞进行试验。同时应用（cell counting Kit-8）CCK-8进行DV2感染前后的细胞活性测定;发色底物法测定DV2组和对照组培养上清液中tPA,PAI-1活性;反转录聚合酶链反应（reverse transcript—polymerase chain reaction,RT-PCR）法检测细胞内TF、TFPI、TM、tPA和PAI-1 mRNA水平。

论文目录

• 1. 中文摘要
• 2. 英文摘要
• 3. 前言
• 2的扩增和HUVECs的感染'>4. 第一部分 HUVECs的分离、培养与鉴定及DV₂的扩增和HUVECs的感染
• 4.1 材料与方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 2对HUVECs凝血系统相关分子表达的影响'>5. 第二部分 DV₂对HUVECs凝血系统相关分子表达的影响
• 5.1 材料与方法
• 5.2 结果
• 5.3 讨论
• 2对HUVECs纤溶系统相关分子表达的影响'>6. 第三部分 DV₂对HUVECs纤溶系统相关分子表达的影响
• 6.1 材料与方法
• 6.2 结果
• 6.3 讨论
• 7. 结论
• 8. 综述 DHF/ DSS中血管内皮细胞对凝血和纤溶系统的调控异常
• 9. 参考文献
• 10. 英文缩写词
• 11. 致谢
• 12. 在学习期间发表相关论文
• 13. 附图