乙酰肝素酶、血管内皮生长因子和核因子-kB在原发性膜性肾病患者肾小球内的表达变化及意义

论文摘要

目的:探讨乙酰肝素酶（Heparanase,Hpa）、血管内皮生长因子（VEGF）和核因子-kB（NF-kB）在膜性肾病（membranous nephropathy,MN）患者肾小球中的表达与蛋白尿、血肌酐的关系,以深刻了解乙酰肝素酶、血管内皮生长因子和核因子-kB对原发性膜性肾（idiopathic membranous nephropathy,IMN）患者的影响,为IMN的治疗提供依据。方法:1、38例经皮肾活检初次确诊的原发性膜性肾病患者列入实验组。6例因肾脏良性肿瘤行一侧肾切除术者列为对照组,取对照组远离病灶的正常肾组织作为肾病理对照标本。原发性膜性肾病实验组（简称IMN组）:男23例,女15例,平均年龄44.08±14.59岁。IMN组根据病理改变分期再分为三个亚组,其中I期MN组31例,男19例,女12例,平均年龄44.79±14.45岁;II期MN组6例,男3例,女3例,平均年龄33.40±9.21岁;III期MN组1例,男性。对照组6例,男5例,女1例,平均年龄岁46.05±10.12岁。2、采用免疫组织化学技术检测对照组与IMN组肾小球内乙酰肝素酶、血管内皮生长因子和核转录因子-kB的表达,用光学显微镜观察和分析病理图像,并用病理图像分析系统计算肾小球各指标阳性面积比率。采用ELISA法检测IMN和正常对照组尿中VEGF含量。记录研究对象的一般情况如经皮肾活检术前是否服用类固醇激素及免疫抑制剂;记录经皮肾活检术前的血清肌酐、白蛋白、血脂、免疫球蛋白、补体、24小时尿蛋白定量等。分析这些指标与IMN组肾小球内Hpa、NF-kB和VEGF表达的相关性及其与尿中VEGF含量的相关性。结果:1、Hpa、VEGF和NF-kB在对照组正常肾组织的肾小球基底膜及肾小管上皮细胞有少量表达。Hpa、VEGF和NF-kB在IMN组肾小球基底膜及肾小管上皮细胞有表达。IMN组肾小球内Hpa阳性面积比率的平均值是50.67±7.39%;VEGF阳性面积比率的平均值是45.18±11.39%;NF-kB阳性面积比率的平均值是42.88%±6.47%。对照组肾小球内Hpa阳性面积比率的平均值是22.21±2.32%;VEGF阳性面积比率的平均值是19.08±3.86%;NF-kB阳性面积比率的平均值是21.23%±2.90%。IMN组肾小球内Hpa、VEGF、NF-kB表达较对照组均明显增强（p<0.01）。I期MN组肾小球内Hpa阳性面积比率的平均值是51.20±7.89%;VEGF阳性面积比率的平均值是49.58±9.1%;NF-kB阳性面积比率的平均值41.46%±4.86%。I期MN组与对照组比较,其肾小球内Hpa、NF-kB和VEGF的表达均明显增强（p<0.01）。II期MN组肾小球内Hpa阳性面积比率的平均值是46.18±3.08%;VEGF阳性面积比率的平均值是30.94±6.3%; NF-kB阳性面积比率的平均值是48.82%±11.73%。II期MN组与对照组比较,其肾小球内Hpa、VEGF和NF-kB的表达均明显增强（p<0.01）。I期MN组与II期MN组比较,肾小球内Hpa、NF-kB的表达差异无显著性（p>0.05）。I期MN组与II期MN组比较,肾小球内VEGF表达差异有显著性（p<0.01）,II期MN组较I期MN组肾小球内VEGF表达减少。2、尿VEGF ELISA结果（分组及所取尿标本与免疫组化所取标本来自同一组患者）:正常对照组6例,VEGF平均值为10.78±9.83,IMN组38例,VEGF平均值为25.46±19.63,两组之间比较有差异（p<0.05）;I期MN 31例,VEGF平均值为16.81±11.37,II、III期MN 7例,VEGF平均值为47.69±19.34,两组之间比较有显著性差异（p<0.01）;II期MN 6例,VEGF平均值为52.43±20.10,III期MN 1例,VEGF值为38.19,I期与II期MN比较有显著性差异（p<0.01）;I期与III期MN比较有差异（p<0.05）;II期与III期MN比较差异无显著性（p>0.05）。3、Hpa和临床指标的相关性:Hpa与24小时尿蛋白定量呈正相关关系,r=0.5407,p<0.01,有统计学意义;与血浆白蛋白呈负相关关系,r=-0.6948,p<0.01,有统计学意义;与血肌酐、血脂、免疫球蛋白无相关性。VEGF和临床指标的相关性:VEGF与24小时尿蛋白定量呈正相关趋,r=0.3011,p>0.05,无统计学意义,在I期IMN VEGF与24小时尿蛋白定量呈正相关关系,r=0.38,p<0.05,有统计学意义;与血浆白蛋白呈负相关趋势,但无统计学意义;与血肌酐、血脂、免疫球蛋白无相关性。NF-kB和临床指标的相关性:NF-kB与24小时尿蛋白定量呈正相关系,r=0.5019,p<0.05,有统计学意义;与血浆白蛋白呈负相关关系,r=-0.6216,p<0.01,有统计学意义;与血肌酐、血脂、免疫球蛋白无相关性。尿VEGF与临床指标的相关性:尿VEGF ELISA结果与24小时尿蛋白定量、血浆白蛋白、血肌酐、血脂、免疫球蛋白无明显相关性。IMN组24小时尿蛋白定量平均值为4.29±2.09g/24h, I期MN组24小时尿蛋白定量平均值为4.29±1.98g/24h,II期MN组24小时尿蛋白定量平均值4.56±2.55g/24h,对照组24小时尿蛋白定量平均值0.02±0.01g/24h;MN组24小时尿蛋白定量明显高于对照组（p<0.01）,I期与II期MN组相比较24小时尿蛋白定量无明显差异（p>0.05）。4 Hpa、VEGF、NF-kB三者之间的相关性分析:Hpa与NF-kB之间呈正相关关系,r=0.4014,p<0.05,有统计学意义;Hpa与VEGF之间无明显相关性,但在I期IMN二者呈正相关关系,r=0.3923,p<0.05,有统计学意义;NF-kB与VEGF之间无明显相关性,但在I期IMN二者呈正相关关系,r=0.49,P<0.01,有统计学意义。结论:1 IMN患者肾小球内NF-kB、Hpa的表达较对照组显著增强,与IMN尿蛋白增多一致,提示NF-kB、Hpa的异常表达参与IMN的肾病理损害与蛋白尿的形成。2 II期MN患者肾小球内VEGF表达较I期MN患者显著减少,与24小时尿蛋白定量无明显相关性,提示VEGF并非IMN患者肾小球损害与尿蛋白形成的主要参与者。相反,VEGF可能有助于IMN向好的方面转归。3 ELISA法检测尿VEGF结果高于国外检测结果,即本组IMN患者尿VEGF较正常对照组增多,与24小时尿蛋白定量无相关性,可能与种属、VEGF亚型、肾脏病状态和研究方法不同有关,有待进一步研究。4虽然VEGF在IMN患者肾小球内的作用有别于NF-kB及Hpa,但Hpa、VEGF、NF-kB三者之间的作用又互相制约。5本实验结果可为IMN的治疗策略进一步提供参考,即适当下调NF-kB与Hpa有益于IMN的转归。

论文目录

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• 研究论文 乙酰肝素酶、血管内皮生长因子和核因子-kB 在原发性膜性肾病患者肾小球内的表达变化及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 乙酰肝素酶与肾小球性蛋白尿
• 致谢
• 个人简历