论文摘要
目的:胰岛素是一种重要的肝生长因子,其在肝细胞再生和肝结构重建过程中发挥着重要的作用。然而,其作用机制尚未完全明确。肝窦状隙内皮细胞在肝脏中数量仅次于肝实质细胞,可通过构建肝窦,增加肝血流,为肝再生提供营养物质和生长因子。血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor VEGF）是已发现的最重要的血管生长因子,通过与窦状内皮细胞表面表达的受体Flt-1、Flk-1的结合,在体内外均可促进内皮细胞的增殖、迁移、分化和血管生成,并且能增加血管的通透性。本实验通过建立大鼠肝切除模型,探讨外源性胰岛素输入对肝窦状隙内皮细胞增殖及VEGF表达的影响。 方法:制作雄性SD大鼠70%的肝切除模型,随机分为实验组和对照组。实验组术后8小时尾静脉输注胰岛素300MU/kg*8h,连续7天;对照组则给予生理盐水。分别于术后0、24、48、72、96、120、144、168小时处死动物。每组每次处死5只,共计80只大鼠。PCNA标记指数检测肝实质细胞及肝窦状隙内皮细胞的增殖状况;VEGF免疫组化,光镜观察肝内VEGF的表达;半定量RT-PCR方法检测肝内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1基因mRNA的表达水平。 结果:肝脏再生的过程中,病理切片结果显示,在胰岛素组中VEGF的表达较对照组相比明显增强;PCNA标记指数显示,与对照组相比,在24h-120h时,胰岛素组中肝细胞的增殖显著性增加,在24h-96h时,胰岛素组中肝窦状隙内皮细胞的增殖显著性增加;半定量RT-PCR显示,与对照组相比,在24h-120h时,胰岛素组中,VEGF mRNA的表达显著性增加,在24h-96h时,胰岛素组中,Flt-1 mRNA的表达显著性增加;而与对照组相比,胰岛素组中,Flk-1 mRNA的表达无显著性差异。结论:外源性的胰岛素输注能够显著促进肝脏的再生。这种作用与增强VEGF及其受体Flt-1的表达,从而促进肝窦状隙内皮细胞的增殖相关。
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